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蘇州千舍生物科技有限公司

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25200-072-Gibco胰酶25200-072|500ml
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貨物所在地:江蘇蘇州市

更新時間:2024-09-06 17:10:49

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Gibco胰酶25200-072|500ml

產(chǎn)品名稱:胰酶

品牌:Gibco

貨號:25200-056

規(guī)格:100ml

備注:-20度

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產(chǎn)品名稱:胰酶

品牌:Gibco

貨號:25200-072

規(guī)格:500ml

備注:-20度

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研究者一般需要考慮兩種細胞培養(yǎng)污染:微生物細胞培養(yǎng)污染和其他細胞系的混入。 兩種污染都非常普遍,必須重視可能的污染以及污染對結(jié)果造成的影響。 應根據(jù)各個研究者的需求和經(jīng)驗來決定是否使用抗生素和抗真菌劑來防止污染。
我們生產(chǎn)了種類繁多的抗生素和抗真菌劑來控制細菌、真菌、支原體和酵母所造成的污染。 研究者嘗試使用抗生素或抗真菌劑來消除或控制污染時,必須要清楚對于特定的細胞系這些物質(zhì)可能是具有毒性的。 使用前,首先進行劑量反應胰酶是一種蛋白酶。通過在特定位置上降解蛋白,使細胞間結(jié)合處蛋白降解,這時細胞由于自身內(nèi)部細胞骨架的張力作用下成為球形,從而使細胞分開。

      不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關,在pH為8.0、溫度為37℃時,胰酶溶液的作用能力強。使用胰酶時,應把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時應選用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。終止消化時,可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細胞的作用。

   胰酶本身就是消化蛋白的,而細胞膜又富含各種膜蛋白,消化過頭會對細胞造成損傷的。
雙抗通常情況下在-20℃保存一年。由于該試劑在4℃下長期存放是不穩(wěn)定的,應分裝后在-20℃下避光保存。青霉素在2-8的℃存放時間不應超過4天,鏈霉素相對穩(wěn)定一點,在2-8℃可以存放30天左右。切記,雙抗從凍融后里面的基本成分已開始降解。

Gibco胰酶25200-072|500ml購買蘇州千舍細胞注意事項:

  一、客戶收到細胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;

  收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。

  二、如為貼壁細胞,請在顯微鏡下觀察細胞密度:

  1. 未超過80%匯合度時,用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴格無菌操作;然后打開蓋子,先把培養(yǎng)基吸出10ml左右,放在離心管里,然后瓶口過火(嚴禁直接傾倒),這樣可以保證不污染,再用10ml的移液管,將剩余的培液全部吸出,放于離心管中,培養(yǎng)瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養(yǎng)16hr(時間根據(jù)細胞生長情況調(diào)整)之后,傳代或者凍存。

  2. 超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:

  1) 棄去培養(yǎng)液,用3ml PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次;

  2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細胞隨即脫落下來;

  3) 加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中,按要求分瓶。

  三、如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。

  注意:換液時一半用我們的培養(yǎng)基,一半用你們的,以免細胞不適應而造成生長不好。

  四、細胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標準是什么?

  (1)細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);

  (2)凍存的細胞復蘇后,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā);

  (3)存活的細胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā);

  (4)凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);

 (5)視具體情況而定。

  五、細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?

  (1)客戶造成細胞污染,不重發(fā);

  (2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);

  (3)細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);

  (4)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);

  (5)細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);

  (6)視具體情況而定。

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Gibco培養(yǎng)基:C11995500BT(DMEM高糖)、C10010500BT(PBS)、C11875500BT(1640)

Hyclone培養(yǎng)基:SH30021.01、SH300243.01、SH30265.01、SH30256.01 

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