產品名稱：人類星形膠質瘤耐替莫唑胺細胞熒光素酶標記  

細胞代碼：U251MG/TMZ+LUC(3000)

培養條件：DMEM+10%FBS +1%P/S +TMZ

生長狀態：貼壁生長

03、細胞培養時能否更換胎牛血清?

首先要確定更換胎牛血清的理由，如果細胞培養無異常的話，不建議隨意更換不同品牌和來源的胎牛血清。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源，所以血清的來源(血源地)和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同地域和等級的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞死亡。

如果是使用的胎牛血清出現了問題，比如保存不當或操作不當導致血清成分析出、混濁、污染等情況，可以優先更換同品牌、等級、批次的血清;如果是產品質量問題更換血清品牌的話，需要用一批細胞進行預實驗才行，以保證細胞能夠正常培養。

另外在購買胎牛血清的時候要選擇正規來源和經過海關檢疫胎牛血清，非正規來源的胎牛血清有很多安全隱患，對實驗室、操作人員、細胞培養、實驗數據都有很大的影響。

04、一般在拿到細胞后，應該注意什么?

收到細胞后先不要開蓋，放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照(建議對收細胞時的培養基拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張)，排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封，出現污染狀況一般可以再申請免費發送一株細胞。

收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養液吸出，留下10ml培養液繼續培養;超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。

細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制。

05、培養細胞什么時候需要換液?

視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數據上的更換時間，按時更換培養基即可。

06、培養基到底要不要加抗生素?

除于特殊篩選系統中外，一般正常培養狀態下，培養基中不應添加任何抗生素。如果是沒有進行過細胞培養的新手，對無菌技術沒有信心的，或者提取的原代細胞，怕污染的，可以適量添加抗生素。抗生素本身也是有毒性的，有些抗生素的藥效濃度水平與毒效濃度水平非常接近，對細胞多少有傷害。

07、培養箱二氧化碳使用比例如何判定?

一般培養基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統，而培養基中NaHCO3的含量將決定細胞培養時應使用的CO2濃度。當培養基中NaHCO3含量為每公升3.7g時，細胞培養時應使用10%CO2;當培養基中NaHCO3為每公升1.5g時，則應使用5CO2培養細胞。

小鼠肝實質細胞 AML-12

小鼠氣道平滑肌細胞 ASMC

小鼠腦神經膠質母細胞 G422

小鼠精原細胞系 GC-1 spg

小鼠主動脈內皮細胞 MAEC

小鼠骨樣細胞 MLO-Y4

小鼠肺上皮細胞 MLE-12

小鼠腎臟內髓集合管3上皮細胞 IMCD3

小鼠胚胎成纖維細胞 3T3-L1

小鼠乳腺癌細胞 4T1

小鼠乳腺癌細胞熒光素酶標記 4T1+luc

小鼠巨噬細胞 Ana-1

小鼠黑色素瘤細胞 B16

小鼠黑色素瘤細胞 B16-F10

小鼠黑色素瘤細胞熒光素酶標記 B16-F10+LUC

小鼠原B細胞株 BAF3

小鼠胚胎成纖維細胞 BALB/3T3 clone A31

小鼠腦微血管內皮細胞株 bEnd.3

小鼠胰島素瘤胰島Beta細胞 Beta-TC-6

小鼠小膠質細胞 BV2

小鼠神經干細胞 C17.2

小鼠成肌細胞 C2C12

小鼠胚胎成纖維細胞 C3H/10T1/2 Clone8  

小鼠結腸癌細胞 CT26

小鼠結腸癌細胞熒光素酶標記 CT26+LUC

小鼠結腸癌細胞 CT26.WT

小鼠胚胎干細胞 E14

小鼠淋巴瘤細胞 EL-4

小鼠乳腺癌細胞 EMT6

小鼠膠質細胞瘤 GL-261

小鼠膠質細胞瘤熒光素酶標記 GL-261+luc

小鼠乳腺上皮細胞 HC11

小鼠肝癌細胞 HEPA1-6

小鼠肝癌細胞熒光素酶標記 HEPA1-6+LUC

小鼠海馬神經元細胞 HT22

小鼠卵巢上皮癌細胞 ID8

小鼠單核巨噬細胞 J774A.1

小鼠骨肉瘤成骨細胞 K7M2WT (K7M2-wt)

小鼠骨肉瘤成骨細胞熒光素酶標記 K7M2WT(K7M2-WT)-LUC

小鼠肺癌細胞 LLC

小鼠肺癌細胞熒光素酶標記 LLC+LUC

小鼠淋巴瘤細胞 L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)

小鼠成纖維細胞 L929

小鼠胰腺癌細胞 LTPA

小鼠乳腺癌高轉移細胞 MA-891

小鼠膀胱癌細胞 MB49

小鼠結腸癌細胞 MC38

小鼠結腸癌細胞熒光素酶標記 MC38+LUC

小鼠胚胎成骨細胞 MC3T3-E1

小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14 MC3T3-E1subclone 14

小鼠胚胎成纖維細胞 MEF

小鼠胚胎成纖維細胞 MEF(霉素C處理)

小鼠前胃癌細胞 MFC

小鼠正常肝細胞 NCTC1469（NCTC CLONE 1469）

小鼠腦神經瘤細胞 neuro-2a

小鼠胚胎細胞 NIH/3T3

小鼠骨髓基質細胞 OP9

小鼠雜交瘤（抗CD2）細胞 OKT11

小鼠畸胎瘤細胞 P19

小鼠白血病細胞 P388

小鼠肥大細胞瘤細胞 P815

小鼠源基于MLV-10A1逆轉錄病毒包裝細胞系 PT-67

小鼠單核巨噬細胞白血病細胞 RAW 264.7

小鼠視網膜神經節細胞 RGC-5

小鼠前列腺癌細胞 RM-1

小鼠雜交瘤 SDOW-17

小鼠骨髓瘤細胞 Sp2/0

小鼠骨髓瘤細胞 Sp2/0-Ag14

小鼠小腸內分泌細胞 STC-1

小鼠腎小球系膜細胞 SV40-MES-13

小鼠淋巴結內皮細胞 SVEC4-10

小鼠睪丸間質細胞 TM3

08、L-谷氨酰胺在細胞培養中重要嗎?

L-谷氨酰胺在細胞培養時是重要的。脫掉氨基后，L-谷氨酰胺可作為培養細胞的能量來源、參與蛋白質的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經過一段時間后會降解，但是確切的降解率一直沒有最終定論。L-谷氨酰胺的降解導致氨的形成，而氨對于一些細胞具有毒性。

09、培養基里的粉紅色是什么?

酚紅一般作為培養基中pH值的指標：當培養基呈中性時為紅色，呈酸性時為黃色，堿性時為紫色。另外，酚紅可以模擬類固醇激素(特別是雌激素)的作用。如果要避免類固醇反應，可以在無酚紅的培養基里進行培養。

10、胰酶里EDTA的作用?

二價的離子會抑制胰酶活性，所以加入EDTA可以螯合掉Ca、Mg這樣的二價離子。胰酶也要注意不要反復凍融。

11、如何避免細胞培養過程中的污染?

主要還是考慮無菌環境，盡量做好操作臺的滅菌，別把培養基滴落在生物安全柜的入風口，別在培養箱里把培養基打翻。這兩個地方霉菌一旦滋生，那你就只能等著用甲醛熏蒸了。

紫外無法殺滅霉菌，酒精也不行，只能用甲醛熏蒸，但是一定要注意安全。復蘇的時候，水浴鍋也需要進行滅菌處理。一旦出現污染，不要急，能救的就用抗生素救一下，但是一般情況下，選擇扔掉。避免交叉感染，要不只能整個實驗室消毒了。

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