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澳洲胎牛血清F8687-500ML
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更新時間:2024-10-28 09:50:14

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澳洲胎牛血清F8687-500ML

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品牌:SIGMA

血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。

胎牛血清是母牛在懷孕五至八月齡胎時,將胎牛取出并進行心臟穿刺取血。穿刺取血可程度的避免外界的污染。而新生牛血清是從剛出生到2周內(nèi)的新生牛靜脈采血。和新生牛血清相比,胎牛血清顯然產(chǎn)量低,成本高。

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相關(guān)血清:    ST30-2602 500ml  (ES級別

胎牛血清

1、性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。

2、蛋白質(zhì)含量 3.5%~5.0%( w/v)

3、血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)

4、無菌檢驗  陰性

5、支原體檢驗  陰性

6、細菌內(nèi)毒素 ≤5(EU/ml)

7、牛腹瀉病毒 陰性

8、大腸桿菌噬菌體 陰性

9、支持細胞增殖(Sp2/0-Ag14)生長曲線(接種濃度)最大增殖濃度≥2.5×106個/ml

細胞倍增時間 ≤15h

克隆率 ≥85%

                    — 熱滅活 —

01

目的

血清的滅活就是將血清置于56℃作用30min,然后將它們分裝儲存于-20℃。熱滅活的目的是為了去除血清中的補體等對熱敏感的物質(zhì),以排除對免疫分析的影響。胎牛血清中對補體的滅活則明顯沒有必要。研究人員曾對商業(yè)胎牛血清中的補體成分進行測定,他們發(fā)現(xiàn)胎牛血清中含有的C1、C6僅達成年動物血清的1-3%,而其它補體成分僅有成年動物的5-50%,至于補體的主要成分C3在胎牛血清中則幾乎不能檢出。通過補體固定實驗,我們也在多個不同批次的胎牛血清中獲得了相似的結(jié)果。此外,多數(shù)實驗室在培養(yǎng)前將培養(yǎng)液進行預熱的過程,也對熱敏的補體有滅活的作用。因此,胎牛血清在大部分的細胞培養(yǎng)中是不需要滅活的,但在免疫學研究中,培養(yǎng)ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。

02

負面影響

雖然熱滅活可以去除血清中的一些物質(zhì),減少免疫球蛋白的細胞毒性而不破壞多肽生長因子,但同時也會對一些血清中較不穩(wěn)定的成分進行破壞,如生長因子和氨基酸。熱滅活通常會降低血清支持細胞生長的能力,并且對血清的加熱經(jīng)常導致血清中沉淀的產(chǎn)生(這些沉淀主要是析出的纖維蛋白以及脂蛋白),而導致的沉淀又常常被認為是微生物的污染。注意到這個現(xiàn)象后,為了驗證污染的存在或促進沉淀的溶解,許多培養(yǎng)者往往將血清放置37℃溫育,這將會導致情況變得更糟,因為血清中的蛋白質(zhì)會進一步的析出,再次破壞血清的營養(yǎng)成分。而為了確定血清未被污染所進行的鏡檢,無菌培養(yǎng)實驗以及革蘭氏染色實驗更是浪費了實驗者大量的時間以及精力,給用戶以及供應(yīng)商帶來不必要的麻煩。

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— 結(jié)論 —

綜上所述,除了在免疫學研究中為排除補體的干擾需要對血清進行滅活外,多數(shù)細胞培養(yǎng)時血清的熱滅活并不是必要的。我們建議,對于那些對血清進行滅活的用戶,需要通過對比試驗來證實其必要性,并確定滅活的適當條件;此外,在滅活過程中,需要嚴格認真監(jiān)測,并選擇一個可重復的方案進行操作。



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