Dnmt1 Chromobody Immunodetection Vector
這些微小的融合蛋白由衍生自重鏈駱駝科動(dòng)物抗體的抗原結(jié)合域（VHH）遺傳融合至熒光蛋白（例如，來(lái)自Evrogen的TagGFP或TagRFP）組成，可以在培養(yǎng)的細(xì)胞內(nèi)內(nèi)源性表達(dá)。與常規(guī)抗體不同，這些創(chuàng)新的熒光納米探針適用于實(shí)時(shí)分析，并且可以可視化活細(xì)胞中的細(xì)胞結(jié)構(gòu)和過(guò)程。

Dnmt1 Chromobody Immunodetection Vector

Dnmt1 Chromobody Immunodetection Vector

 

Dnmt1染色體體的小尺寸可產(chǎn)生高信噪比，以產(chǎn)生令人震驚的高分辨率圖像或染色質(zhì)甲基化動(dòng)力學(xué)的定時(shí)電影。值得注意的是，它對(duì)甲基化模式?jīng)]有影響，并且在大多數(shù)細(xì)胞類型中均表現(xiàn)出極低的毒性。只需用Dnmt1 Chromobody質(zhì)粒轉(zhuǎn)染您選擇的細(xì)胞系即可。該質(zhì)粒包含與TagRFP或TagGFP（Evrogen）融合的Dnmt1特異性羊駝抗體的序列。轉(zhuǎn)化后，您的細(xì)胞將表達(dá)Dnmt1染色體抗體。由于熒光體分子特異地定位于DNA甲基轉(zhuǎn)移酶，因此細(xì)胞核將發(fā)出擴(kuò)散和點(diǎn)狀的熒光。

Dnmt1染色體在細(xì)胞中的實(shí)時(shí)可視化

用Dnmt1-Chromobody質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞，并在生長(zhǎng)和分裂過(guò)程中對(duì)其進(jìn)行觀察。每30分鐘對(duì)細(xì)胞成像24小時(shí)?？笵nmt1-TagRFP染色體抗體將DNA甲基轉(zhuǎn)移酶與細(xì)胞核結(jié)合。在G期細(xì)胞中，信號(hào)通過(guò)細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)均勻分布。隨著時(shí)間的流逝，在S期，顆粒以復(fù)制灶的形式出現(xiàn)在細(xì)胞核中，后顆粒消失，細(xì)胞分裂。

在整個(gè)細(xì)胞周期中，Dnmt1-Chromobody轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞的靜態(tài)圖像。這次，使用抗Dnmt1-TagGFP融合蛋白，隨著細(xì)胞通過(guò)S期，復(fù)制灶的形成可以看成亮綠色的點(diǎn)。Dnmt1-Chromobody不影響正常細(xì)胞功能。

染色體將您的細(xì)胞變成免疫報(bào)告工廠

納米抗體是*的小抗體片段，表現(xiàn)出與靶蛋白的超高效結(jié)合。在動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的納米抗體可以被收集并用于體外研究。當(dāng)納米抗體表達(dá)為與報(bào)告分子（例如GFP）的融合體時(shí)，發(fā)生了一些出乎意料的事情。新形成的染色體抗體直接與目標(biāo)細(xì)胞內(nèi)的靶標(biāo)結(jié)合。而且，使用正確的載體和啟動(dòng)子，結(jié)合具有高特異性和低背景。這為GFP-融合與感興趣的蛋白質(zhì)的免疫定位研究提供了*的選擇。為什么？因?yàn)橐呀?jīng)顯示了GFP和RFP融合可以阻斷或改變?nèi)诤系鞍椎幕钚?。相反?/p>