對于研究專業人士
為了維持生命,細胞分裂、增殖和死亡,或以靜止狀態存在。為了決定是否進入細胞周期,細胞整合來自各種細胞內和細胞外信號的信息。細胞內信號中最主要的是屬于口袋蛋白家族的蛋白質的磷酸化,例如 p107、p130 和視網膜母細胞瘤蛋白 (Rb)。從細胞周期蛋白依賴性激酶 2 (CDK2) 的激活到 E2F 靶標轉錄的結合再到 Rb 磷酸化的一系列信號轉導事件有助于維持細胞周期進程。1 細胞分裂后,細胞要么進入另一個細胞周期,要么降低 CDK 活性并進入靜止狀態。作為對細胞凋亡過程中 DNA 損傷的反應,細胞也在基因水平上被編程為死亡。2 細胞凋亡由 caspase 介導的信號轉導途徑觸發。細胞分裂、增殖、凋亡和死亡是生命的組成部分。
細胞周期
細胞周期有兩個主要階段:間期(有絲分裂事件之間的階段)和有絲分裂期(其中母細胞分裂成兩個遺傳上相同的子細胞)。間期具有三個不同的、連續的階段。在稱為 G1 的第一階段,細胞監測其環境,當收到必要的信號時,細胞合成 RNA 和蛋白質以誘導生長。當條件合適時,細胞進入細胞周期的 S 階段并進行 DNA 合成并復制其染色體 DNA。最后,在 G2 期,細胞繼續生長并為有絲分裂做準備。
BD Biosciences為細胞周期研究提供多種試劑和資源。
細胞增殖
細胞增殖是由于生長和分裂而導致的細胞數量的增加。細胞增殖和凋亡的平衡對于發育和正常組織穩態都很重要。許多技術用于評估細胞增殖。在細胞周期的合成 (S) 階段,DNA 聚合酶將各種核苷(脫氧腺苷、脫氧鳥苷、脫氧胞苷和胸苷)摻入新延伸的 DNA 鏈中。使用這些核苷的類似物提供了一種測量細胞增殖的方法。 5-溴-2'-脫氧尿苷 (BrdU) 是一種胸苷類似物,廣泛用于測量 DNA 從頭合成。一些細胞周期相關蛋白,例如 Ki-67,也被用作細胞增殖的指標。熒光或非熒光細胞質增殖染料也可用作細胞增殖的測量。3
BD Biosciences 提供 BD Horizon™ 紫色增殖染料 450 和 BD Horizon™ CFSE,分別用于使用紫色激光和藍色激光檢測細胞增殖,這有利于使用更大的面板。這樣可以使用多色流式細胞術從有限的樣品中確定更多數據。
兩種增殖染料都是非熒光酯化染料。酯基允許染料進入細胞。一旦染料進入細胞內,酯酶就會裂解酯基,將染料轉化為熒光產物并將其捕獲在細胞內。隨著每次復制事件,細胞中的染料量都會減少,從而形成特征圖案。
細胞凋亡和細胞死亡
細胞凋亡是一個有組織的過程,它向細胞發出信號以進行自我毀滅以進行細胞更新或控制異常細胞的生長。當細胞受損或不再需要時,它們會發生凋亡或程序性細胞死亡,這是胚胎發育和組織穩態過程中發生的正常生理過程。細胞凋亡控制受損細胞的有序死亡,而壞死是由于組織損傷而發生的,導致受損細胞和周圍細胞的損失。
細胞凋亡過程具有某些形態學特征。這些包括質膜的變化(例如膜對稱性的喪失和膜附著的喪失)、細胞質和細胞核的濃縮、蛋白質裂解和 DNA 的核小體間裂解。在該過程的最后階段,垂死的細胞分裂成凋亡小體,并因此被吞噬細胞消除,而不會對周圍細胞造成明顯的炎癥損傷。
通過細胞制劑類型檢測凋亡或死亡細胞(活力)的方法。
然而,某些細胞類型不表現出細胞凋亡的特征。在這些情況下,可能需要分析細胞凋亡的多個方面,以確認細胞死亡的機制。
為了滿足這些要求,BD Biosciences 提供了很多方面的 細胞凋亡檢測工具和技術 ,用于測量細胞凋亡過程中不同階段的指標。
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