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Bradford蛋白濃度測定試劑盒
產品貨號:16005
產品規格:500次/1000次
產品簡介:
Bradford蛋白濃度測定試劑盒(Bradford Protein Assay Kit)是根據的兩種蛋白濃度檢測方法之一Bradford法研制而成,實現了蛋白濃度測定的快速,穩定和高靈敏度。檢測速度極快,10-20個樣品只需不足10分鐘即可完成。靈敏度高,檢測濃度下限達到25μg/ml,最小檢測蛋白量達到0.5μg,待測樣品體積為1-20μl。在50-1000μg/ml濃度范圍內有較好的線性關系。
Bradford法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質的影響。樣品中β-巰基乙醇的濃度可高達1M,二硫蘇糖醇的濃度可高達5mM。但受略高濃度的去垢劑影響。需確保SDS低于0.01%,Triton X-100低于0.05%,Tween 20,60,80低于0.015%。含去垢劑的樣品推薦使用BCA蛋白濃度測定試劑盒。
包裝清單:
產品名稱 | 500次包裝 | 1000次包裝 | 儲存條件 |
Bradford溶液 | 100ml | 200ml | 2-8℃ |
蛋白標準BSA (5mg/ml) | 1ml | 2ml | -20℃ |
操作步驟:
1. 蛋白標準品的準備
融化蛋白標準品,取10μl稀釋至100μl,使終濃度為0.5mg/ml。蛋白樣品在什么溶液中,標準品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡便起見,也可以用0.9%NaCl或PBS稀釋標準品。
2. 蛋白濃度測定
a. 將標準品按0、1、2、4、8、12、16、20μl加到96孔板的標準品孔中,加標準品稀釋液補足到20μl, 相當于標準品濃度分別為0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml。
b. 加適當體積樣品到96孔板的樣品孔中。如果樣品不足20μl,需加標準品稀釋液補足到20μl。請注意記錄樣品體積。
c. 各孔加入200μl Bradford溶液,室溫放置3-5分鐘。
d. 用酶標儀測定A595,或560-610nm之間的其它波長的吸光度。
e. 根據標準曲線和使用的樣品體積計算出樣品中的蛋白濃度。
注意事項:
1. Bradford溶液使用前請顛倒3-5次,混勻。
2. 蛋白標準請在全部溶解后先混勻,再稀釋成一系列不同濃度的蛋白標準。
3. 將Bradford溶液恢復到室溫再使用,有利于提高檢測的靈敏度。
4. 需可檢測560-610nm之間波長的酶標儀一臺,最佳檢測波長為595nm。并需96孔板。
5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
保存條件:
Bradford溶液4℃保存,蛋白標準-20℃保存,本試劑盒自訂購之日起12個月內有效。
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