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花青素(Anthocyan)檢測(cè)試劑盒(比色法)
產(chǎn)品貨號(hào):BA1609
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
花青素(anthocyan,cyanidin)又稱花色素(anthocyanidin),屬黃烷衍生物,溶解于細(xì)胞液中,是植物體內(nèi)廣泛分布的花色素之一,是花色素苷(anthocyains, anthocyanin) 水解而得的有顏色的苷元。植物體內(nèi)存在花青素、葉綠素、類胡蘿卜素、類黃酮、酚類等物質(zhì)與花、果實(shí)和葉片的顏色有關(guān),而且與果實(shí)等樣品衰老過(guò)程密切相關(guān),對(duì)其加工性能、存儲(chǔ)、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值等都有重要影響。
尚寶生物 植物花青素檢測(cè)試劑盒(比色法)檢測(cè)原理是花青素溶于有機(jī)溶劑,以有機(jī)溶劑粗提花青素,花青素在酸性溶液中呈紅色,顏色深淺與花青素含量呈正比,于530nm有最大吸收波,可利用分光光度計(jì)測(cè)定其吸光度,進(jìn)而計(jì)算出花青素的含量,方法簡(jiǎn)單易行。因組織中花青素種類不同,所需標(biāo)準(zhǔn)品亦不同,本產(chǎn)品不含標(biāo)準(zhǔn)品,因此只能檢測(cè)花青素的相對(duì)含量。如需檢測(cè)樣品中花青素的準(zhǔn)確含量,請(qǐng)自備對(duì)應(yīng)種類的花青素標(biāo)準(zhǔn)品,主要用于植物組織或果實(shí)中花青素的提取以及定量檢測(cè)花青素相對(duì)含量。該試盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
產(chǎn)品名稱 | 50T | 保存條件 |
Anthocyan Assay Buffer | 500ml | 室溫 |
自備材料:
1. 實(shí)驗(yàn)材料:桃子、李子、蘋(píng)果、杏等果實(shí)或其他植物組織
2. 研缽或勻漿器
3. 離心管、離心機(jī)
4. 濾紙或紗布
5. 比色杯
6. 分光光度計(jì)
操作步驟 (僅供參考) :
1. 花青素提取:
方法一:
①4℃預(yù)冷研缽或勻漿器,以及Anthocyan Assay Buffer。
②取植物組織,洗凈,擦干,稱取新鮮樣品0.25g,剪碎,置于研缽或勻漿器中。
③加入2~3ml Anthocyan Assay Buffer,充分研磨或勻漿后轉(zhuǎn)入10ml離心管,用Anthocyan Assay Buffer沖洗研缽或勻漿器并轉(zhuǎn)移至離心管,補(bǔ)加Anthocyan Assay Buffer至8ml。
④4℃避光靜置20min,期間搖動(dòng)2~3次,然后過(guò)濾至離心管,也可用離心機(jī)8000r/min離心3min,濾液(上清液)即為花青素粗提液。
方法二:
將樣品按上述比例加入提取液中,置于32℃溫箱浸提4~8h(期間可搖動(dòng)數(shù)次) ,或室溫下避光浸提24h,離心取上清即為花青素粗提液。
2. 加樣及測(cè)定:取1cm比色皿,用Anthocyan Assay Buffer做空白對(duì)照,取花青素提取液(1~2ml)用分光光度計(jì)在530nm波長(zhǎng)處讀取吸光度值。如果花青素濃度過(guò)高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定,樣品的檢測(cè)最好能設(shè)置2平行孔,求平均值。
計(jì)算:
花青素單位定義:以OD值為0.1時(shí)的花青素濃度稱為一個(gè)單位(U)。計(jì)算方法如下:
組織樣品的花青素含量(U/g)=(A測(cè)定-A空白)/(0.1xW)
式中:A測(cè)定=花青素提取液在530nm的OD值
A空白=空白對(duì)照在530nm的OD值
W=樣品鮮重(g)
亦可用自備的花青素標(biāo)準(zhǔn)品做梯度稀釋 (0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、1mg/ml),用Anthocyan Assay Buffer 做空白對(duì)照,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,進(jìn)而計(jì)算出樣品中花青素的含量。
組織樣品的花青素(mg/g)={C×VT }/(W×V1 )
式中:C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的測(cè)定管花青素含量(mg/ml)
V T =花青素粗提液總體積(ml)=8
V 1 =加樣時(shí)所用花青素粗提液的體積(ml)
W=樣品鮮重(g)
液體樣品的花青素(mg/ml)=C×N/V
式中:C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得的測(cè)定管花青素含量(mg/ml)
V=加樣時(shí)所用花青素粗提液的體積(ml)
N=稀釋倍數(shù)
注意事項(xiàng):
1. 為了避免花青素見(jiàn)光發(fā)生變化,操作時(shí)應(yīng)盡量避光,研磨或勻漿應(yīng)盡量縮短時(shí)間。
2. 取樣量、試劑用量應(yīng)根據(jù)花青素含量適當(dāng)調(diào)整。
3. Anthocyan Assay Buffer應(yīng)密閉保存,避免有效成分揮發(fā)。
4. 如果沒(méi)有分光光度計(jì),也可以使用酶標(biāo)儀測(cè)定。
5. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期:12個(gè)月有效。
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