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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50次,100次 |
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貨號 | 12010 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
產品簡介:
本組蛋白提取試劑盒是由一套完整的優化 buffer 和試劑組成,用于從哺乳動物細胞或組織中提取總組蛋 白(H2A、H2B、H3 和 H4),整個流程可在 80min 內完成,且可保持組蛋白提取物中的翻譯后修飾(PTM) 完整性,因此提取物可用于各種翻譯后修飾檢測及應用,包括組蛋白甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化、 SUMO 化和 ADP-核糖基化作用研究。
包裝清單:
產品名稱 | 50 次 | 100 次 | 儲存條件 |
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Lysis Buffer 1 | 50ml | 100ml | 室溫 |
Lysis Buffer 2 | 10ml | 20ml | 室溫 |
Balance Buffer | 2ml | 4ml | 室溫 |
Adjust Buffer | 200μl | 300μl | -20℃ |
產品特點:
1.所提取組蛋白可保留所有相關翻譯后修飾,包括甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化、SUMO 化、 ADP-核糖基化以及 Neddylation 等。
2.建議每次從 10 8個細胞/0.1g 組織中提取組蛋白樣品。
3.整個實驗流程約需 80min。
4.無需超速離心。
操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預冷 PBS 清洗殘留培養基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應用于下游研究。
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