您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海尚寶生物科技有限公司>>試劑盒>>核酸類>> 哺乳動(dòng)物基因組DNA抽提試劑盒 核酸類
其他品牌
生產(chǎn)商
上海市
50T 190元 999盒可售
100T 340元 999盒可售
更新時(shí)間:2021-09-26 17:17:15瀏覽次數(shù):226次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T/100T |
---|---|---|---|
貨號(hào) | 11065 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
哺乳動(dòng)物基因組DNA抽提試劑盒 核酸類
產(chǎn)品貨號(hào):11065
產(chǎn)品規(guī)格:50T/100T
產(chǎn)品簡介:
哺乳動(dòng)物基因組DNA抽提試劑盒 核酸類用分子生物學(xué)技術(shù)研究復(fù)雜的基因組,首先要求制備純凈的高分子質(zhì)量DNA,一般分為兩個(gè)步驟,先裂解細(xì)胞、溶解DNA,接著采用酶學(xué)或化學(xué)方法去除蛋白、RNA以及其他大分子。尚寶生物 哺乳動(dòng)物基因組DNA抽提試劑盒(Mammalian genomic DNA extraction kit)采用經(jīng)典的蛋白酶K處理法,可以抽提到100~150kb以上的基因組DNA,提取的基因組DNA可用于Southern雜交、基因組DNA的PCR擴(kuò)增及基因組DNA文庫的構(gòu)建等。該試劑盒的提取效率大致為,從1g組織可以提取到約150~200μg 100kb以上的基因組DNA,從10 ~10 Hela細(xì)胞可以提取到約5~50μg 100kb以上的基因組DNA。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
試劑盒內(nèi)容 | 50T | 100T | 保存條件 |
試劑(A): 樣品裂解液 | 50ml | 100ml | 4℃ |
試劑(B): 蛋白酶K溶液 | 150μl | 300μl | -20℃,避光 |
試劑(C): 乙酸銨溶液 | 10ml | 20ml | 室溫 |
試劑(D): Nuclease Free Water | 10ml | 20ml | 室溫 |
自備材料:
1. 組織或培養(yǎng)細(xì)胞
2. PBS
3. 無水乙醇、70%乙醇
4. 25:24:1 酚/氯仿/異戊醇
操作步驟(僅供參考):
1. 準(zhǔn)備樣品:
①組織樣本:切下組織并立即剪成小塊,置于液氮中凍結(jié)。將 100mg~1g 凍結(jié)的組織用預(yù)冷的研缽和研杵研碎或用錘子將其搗成碎末。培養(yǎng)細(xì)胞:收集貼壁生長或懸浮生長細(xì)胞培養(yǎng)液,貼壁生長細(xì)胞需先用胰蛋白酶消化液消化,再用 PBS 清洗一次。4℃離心機(jī),1000~2000g 離心 1~2min,棄上清。用 1~10ml 預(yù)冷的 PBS 再次懸浮離心,如此 2 次洗滌。
2. 每 1ml 樣品裂解液加入 5μl 的蛋白酶 K 溶液,混勻。每 50mg 組織或 5×107 細(xì)胞用 0.5~0.6ml 樣品裂解液懸浮,懸浮應(yīng)*,不應(yīng)留下結(jié)塊。
3. 充分混勻,50℃振蕩下溫育 12~18h 或過夜。
4. 加入等體積 25:24:1 酚/氯仿/異戊醇,輕輕混合,盡可能減少對(duì) DNA 的剪切。
5. 吸出酚相及中間相(可以吸除少量靠近中間相的水相液體),剩余的水相用等體積酚/氯仿/異戊醇再抽提一次。重復(fù)該步驟 1 次。
6. 吸取上層液(水溶液)250~300μl 至新 EP 管中,加入等體積無水乙醇和 1/4 體積的乙酸銨溶液,顛倒混勻數(shù)次。
7. 4℃ 10000g 1min,棄上清。
8. 加入 70%乙醇,4℃ 10000g 1min,棄上清。重復(fù)該步驟一次。
9. 盡量吸除殘余的乙醇,空氣干燥,等到不到明顯液體時(shí),立即加入 50~100μl Nuclease Free Water 溶解 DNA,4℃或-20℃保存。
注意:不可過分干燥基因組 DNA 沉淀,否則會(huì)極難溶解。如果發(fā)現(xiàn) DNA 沉淀難以溶解,可以在 4℃用搖床緩慢搖動(dòng)過夜,以溶解 DNA 沉淀。
10. A 260 /A 280 處檢測 DNA 純度,高純度的 DNA 一般 A 260 /A 280>1.8。
注意事項(xiàng):
1. 如果打算提取大片段的基因組 DNA,應(yīng)盡量避免基因組 DNA 的物理性剪切。例如避免劇烈振蕩含有基因組DNA 的樣品,可以用剪掉槍頭尖的槍頭吸取基因組 DNA 的樣品。
2. 準(zhǔn)備細(xì)胞樣品時(shí),如果細(xì)胞量過少(<3×107 ),應(yīng) 0.3ml 含蛋白酶 K 的樣品裂解液。
3. 為避免高分子質(zhì)量 DNA 被剪切,可以不采用乙醇沉淀 DNA,可用透析袋替代乙醇:在 100 倍體積的 TE buffer中至少透析 2 次,所用取全部時(shí)間應(yīng)>24h。
4. 不可過分干燥基因組 DNA 沉淀,否則會(huì)極難溶解。5. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期: 6個(gè)月有效。
· 細(xì)胞活力/毒性檢測試劑盒
· 蛋白提取相關(guān)試劑盒
· 蛋白定量/濃度測定試劑盒
· 核酸純化/提取相關(guān)試劑盒
· 核酸檢測試劑盒
· 染色試劑盒
· 生化試劑盒檢測試劑盒
染色液 固定液 脫鈣液 染色輔助試劑 指示劑
熒光染料
產(chǎn)品種類齊全
品質(zhì)*穩(wěn)定
備貨充足發(fā)貨迅速
先后開發(fā)了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域的多種試劑及試劑盒。同時(shí),尚寶生物公司提供各種常規(guī)生化試劑,可隨時(shí)為廣大科研工作者提供各類專業(yè)試劑。
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。