總膽固醇（TC）檢測試劑盒（鄰苯二甲醛比色法）

產品貨號: BA1761

產品規格:60T

產品簡介：

膽固醇(Cholesterol)又稱膽甾醇，是一種環戊烷多氫菲的衍生物，分子式C27H46O。膽固醇廣泛存在于動物體內，其中腦、神經組織豐富，在腎、脾、皮膚、肝和膽汁中含量也較高。總膽固醇(TC)檢測試劑盒(鄰苯二甲醛比色法)檢測原理是膽固醇及其脂，在強酸存在下與鄰苯二甲醛反應，產生紫紅色化合物，該化合物在550nm波長處有最大吸收峰，分光光度計在550nm處進行比色測定，膽固醇含量在4mg/ml之內與吸光度呈良好線性關系。本試劑盒用于人或動物的血清、血漿、腦脊液、細胞、組織等樣本中的總膽固醇含量定量測定。

產品組成：

操作步驟（僅供參考）：

1.        樣本處理：

①血清、血漿、腦脊液樣本：從待測樣本中分理出的血清或血漿不應有溶血，直接檢測，如超過線性范圍，用生理鹽水稀釋后檢測。

②細胞樣本：

a、取適量的細胞(一般推薦>106以上)，離心，棄上清，留取沉淀。

b、用PBS或生理鹽水清洗1~2次，離心，棄上清，留取沉淀。

c、加入PBS或生理鹽水勻漿，冰浴條件下超聲破碎細胞，功率300W，每次3~5s，間隔30s，重復3~5次。

③組織樣本：準確稱取適量組織樣本，按質量(g)：生理鹽水=的比例，加入生理鹽水，冰浴條件下手動或機械勻漿。離心，取上清待用。

2.        配制膽固醇標準工作液：按膽固醇標準(1mg/ml)：TC assay buffer的比例準確混合，即為膽固醇標準工作液(0.1mg/ml)，然后按下表依次稀釋膽固醇標準工作液。

3.        配制鄰苯二甲醛工作液：取1瓶(10mg)鄰苯二甲醛粉劑的準確加入鄰苯二甲醛稀釋液1，充分混勻，即為鄰苯二甲醛工作液。4℃避光保存，2周有效。?

4.        配制強酸工作液：取適量的TC?assay?buffer和濃硫酸等量混合，即為強酸工作液。注意：本試劑盒不提供濃硫酸，需用戶自備。二者混合時，一定小心操作，以免誤傷自己。配制好的強酸工作液工作液中的硫酸含量應準確，否則有可能影響顯色效果。?

5.        分光光度計膽固醇測定操作:?

①按下表依次加入試劑：

②充分混勻,?靜置。?

③以分光光度計，1cm比色杯測定550m吸光度，以空白管調零，讀取標準管和各待測管的吸光度。?

?

計算：?以吸光度為縱坐標，以膽固醇濃度為橫坐標，作標準曲線。對照標準曲線即知待測樣本的濃度。

注意事項：

1.        上述低溫試劑避免反復凍融，以免失效或效率下降。?

2.        本法可直接用于檢測腦脊液中的TC含量，也可直接檢測尿液中的TC含量。?

3.        待測樣本如不能及時測定，應置于2~8℃保存，3天內穩定。?

4.        如果樣本TC濃度過高，結果可能呈假性降低，應用生理鹽水稀釋后重測，結果乘以稀釋倍數。

有效期：6個月有效。