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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50T |
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貨號 | BA1722-50 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
維生素C檢測試劑盒(菲咯啉比色法)
產品貨號:BA1722
產品規格:50T
產品簡介:
維生素C(Vitamin C)又稱L-抗壞血酸,是高等靈長類動物與其他少數生物的必需營養素。在生物體內,維生素C是一種抗氧化劑,為酸性己糖衍生物,是稀醇式己糖酸內酯,保護身體免于自由基的威脅,同時也是一種輔酶,其廣泛的食物來源為各類新鮮蔬果。Vc有L-型和D-型兩種異構體,只有L-型的才具有生理功能,還原型和氧化型都有生理活性。
尚寶生物 維生素C檢測試劑盒(菲咯啉比色法)檢測原理是在酸性條件下,維生素C把三價鐵離子還原成亞鐵離子,后者與菲咯啉形成穩定的紅色螯合物,以分光光度計534nm處檢測吸光度,在一定濃度范圍(樣品濃度控制在10~250μ g/ml)吸光度與維生素C含量呈線性關系,獲得Vitamin C含量。該試劑盒主要用于植物組織中的維生素C(抗壞血酸)的檢測,其優點是:1、反應穩定,不易褪色;2、操作簡便;3、還原糖及其他常見的還原物質對實驗沒有干擾,因此專一性好;4、靈敏度高。本試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產品組成:
產品名稱 | 50T | 儲存條件 |
試劑(A): Vitamin C標準(250μg/ml) | 5ml | 4℃,避光 |
試劑(B): 組織勻漿液(5×) | 500ml | 室溫,避光 |
試劑(C): 酸性緩沖液 | 30ml | 室溫 |
試劑(D): Vitamin C Assay buffer | 30ml | 室溫,避光 |
試劑(E): 菲咯啉顯色液 | 60ml | 4℃,避光 |
自備材料:
1. 蒸餾水
2. 無水乙醇
3. 研缽或勻漿器
4. 離心管或試管
5. 離心機
6. 比色杯
7. 分光光度計
操作步驟:
1. 稀釋組織勻漿液:按組織勻漿液(5×):蒸餾水=4:1的比例稀釋,獲得1×組織勻漿液,待用。
2. 準備樣品:取待測材料如青菜、水果、松針等,清洗擦干,準確稱量5g,加入研磨器內。加入少量1×組織勻漿液,研磨碎,留取上清,再次用1×組織勻漿液研磨,最后一并倒入50ml離心管,補充1×組織勻漿液至45ml。充分混勻后,4000g離心5min,上清液即為待測液。
3. 配制系列Vitamin C標準:取干凈離心管或試管,按下表進行操作,依次稀釋。
加入物(ml) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
Vitamin C標準(250μg/ml) | 0.04 | 0.08 | 0.16 | 0.24 | 0.32 | 0.4 |
蒸餾水 | 0.96 | 0.92 | 0.84 | 0.76 | 0.68 | 0.6 |
相當于Vitamin C含量(μg) | 10 | 20 | 40 | 60 | 80 | 100 |
4. Vitamin C加樣:按照下表設置空白管、標準管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并注意避免產生氣泡。如果樣品中的 Vitamin C 含量過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。樣品的檢測最好能設置2平行管,求平均值。
加入物 | 空白管 | 標準管 | 測定管 |
1×組織勻漿液 | 1.0 | - | - |
系列Vitamin C標準(1-6號) | - | 1.0 | - |
待測液 | - | - | 1.0 |
無水乙醇 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
酸性緩沖液 | 0.25 | 0.25 | 0.25 |
Vitamin C Assay buffer | 0.25 | 0.25 | 0.25 |
菲咯啉顯色液 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
5. Vitamin C測定:立即混勻,以空白調零,比色光徑1cm,以分光光度計測定534nm處系列標準管、測定管的吸光度。
計算:
以系列標準Vitamin C (10、20、40、60、80、100μg)為橫坐標,以對應的吸光度為縱坐標,繪制標準曲線,求得回歸方程。以測定管吸光度代入回歸方程求得維生素C含量。
維生素C含量(mg/100g)=(m0×V T×100)/(m1×VS×1000)
式中:m0 =根據待測樣品的吸光度在標準曲線求得的維生素C的質量(μg)
VT =待測液的總體積(ml)
m1 =樣品質量(g)
VS =測定時取樣體積(ml)
100=100g
注意事項:
1. 上述低溫試劑避免反復凍融,以免失效或效率下降。
2. 組織勻漿液(5×)久置或低溫保存,容易產生乳白色渾濁。如果白色渾濁不明顯,可以直接使用,不影響效果;如果白色渾濁較多,應棄用。
3. 待測樣本如不能及時測定,應置于2~8℃保存,3天內穩定。
4. 如果樣品濃度過高,應用蒸餾水稀釋后重測,結果乘以稀釋倍數。
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