山梨醇含量檢測試劑盒（可見分光光度法）

注意：正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定。

產品貨號：BA1274

產品規格：50管/48樣

產品簡介：

山梨醇廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，不僅是糖運輸形式之一，而且與生物抗逆性和食物風味密切相關。因此，在糖代謝、抗逆性和食品研究中經常需要檢測山梨醇含量變化。

山梨醇在堿性溶液中與銅離子形成藍色絡合物，在655nm波長有特征吸收峰。

產品內容：

試劑一：液體15mL×1瓶，4℃保存；

試劑二：液體15mL×1瓶，4℃保存；

標準品：粉劑10mg×1支，4℃保存。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、水浴鍋、移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、山梨醇的提取：

按照組織質量（g）：蒸餾水體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.2g組織，加入2mL蒸餾水），研磨成勻漿， 95℃水浴10分鐘（蓋緊，以防止水分散失），冷卻后，8000g，25℃離心10min，取上清液待測。

標準樣品準備：將標準液用1ml蒸餾水溶解，溶液濃度為10mg/ml，稀釋至2、1、0.5、0.25、0.125、0mg/ml。

二、測定步驟

1、分光光度計預熱30min以上，調節波長至655nm，蒸餾水調零。

2、加樣表（在EP管中依次加入下列試劑）：

混勻后室溫靜置15min，10000g，常溫離心10min，取上清液測655nm 下吸光值A。

三、山梨醇含量計算：

1、根據標準溶液的濃度和吸光度建立標準曲線； y為標準品濃度（mg/mL），x為吸光值。計算樣本中山梨醇的含量y值（mg/mL）。

2、按照樣本質量計算

山梨醇含量（mg /g鮮重）＝y×V1÷(W×V1÷V2)= 2y÷W

3、按照樣本蛋白濃度計算

山梨醇含量（mg /mg prot）＝y×V1÷(V1×Cpr)=y÷Cpr

V1：加入樣本體積，1mL；V2：加入提取液體積，2mL；Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/mL；W：樣本質量，g。