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過氧化氫酶(CAT)活性檢測試劑盒

參  考  價(jià):面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號

    BA1107-50

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    上海市

更新時(shí)間:2021-11-23 13:48:13瀏覽次數(shù):210次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/48樣
貨號 BA1107-50 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
過氧化氫酶(CAT)活性檢測試劑盒
CAT(EC 1.11.1.6)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是最主要的H2O2清除酶,在活性氧清除系統(tǒng)中具有重要作用。

H2O2在240nm下有特征吸收峰,CAT能夠分解H2O2,使反應(yīng)溶液240nm下的吸光度隨反應(yīng)時(shí)間而下降,根據(jù)吸光度的變化率可計(jì)算出CAT活性。

過氧化氫酶(CAT)活性檢測試劑盒(紫外分光光度法)

注意:正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定。

 

產(chǎn)品貨號:BA1107

 

產(chǎn)品規(guī)格:50/48

 

產(chǎn)品簡介:

CAT(EC 1.11.1.6)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是最主要的H2O2清除酶,在活性氧清除系統(tǒng)中具有重要作用。

H2O2240nm下有特征吸收峰,CAT能夠分解H2O2,使反應(yīng)溶液240nm下的吸光度隨反應(yīng)時(shí)間而下降,根據(jù)吸光度的變化率可計(jì)算出CAT活性。

 

產(chǎn)品內(nèi)容:

提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存;

試劑一:液體60mL×1瓶,4℃保存;

試劑二:液體100μL×3瓶,4℃保存。

 

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

 

操作步驟:

一、粗酶液提?。?/span>

1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備

細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500-1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%200w,超聲3秒,間隔10秒。重復(fù)30次);8000g 4℃離心10分鐘,取上清,置冰上待測。

組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為15-10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10分鐘,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

二、CAT測定步驟:

1、 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至240nm處,蒸餾水調(diào)零。

2、CAT檢測工作液的配制:用時(shí)在每瓶試劑二中加入20mL試劑一,充分混勻,作為工作液;用不完的試劑4℃保存一周。

3、測定前將CAT檢測工作液在37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)水浴10min。

4、取1mLCAT檢測工作液于1mL石英比色皿中,再加入35μL樣本,混勻5s;室溫下立即測定240nm下的初始吸光值A11min后的吸光值A2。計(jì)算ΔA=A1-A2

三、CAT活性計(jì)算:

1、血清(漿)CAT活力的計(jì)算:

單位的定義:每毫升血清(漿)在反應(yīng)體系中每分鐘催化1nmol H2O2降解定義為一個(gè)酶活力單位。

CAT(U/mL)= [ΔA×V反總÷ε×d×109]÷V÷T=678×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中CAT活力計(jì)算:

1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位的定義:每mg組織蛋白在反應(yīng)體系中每分鐘催化1nmol H2O2降解定義為一個(gè)酶活力單位。

CAT(U/mg prot)=[ΔA×V反總÷ε×d×109V×Cpr÷T=678×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計(jì)算:

單位的定義:每g組織在反應(yīng)體系中每分鐘催化1nmol H2O2降解定義為一個(gè)酶活力單位。

CAT(U/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷ε×d×109W×V÷V樣總)÷T=678×ΔA÷W

3 按細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量計(jì)算:

單位的定義:每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞在反應(yīng)體系中每分鐘催化1nmol H2O2降解定義為一個(gè)酶活力單位。

CAT(U/104 cell)[ΔA×V反總÷ε×d×109500×V÷V樣總)÷T=1.356×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,1.035×10-3L;ε: H2O2摩爾吸光系數(shù),4.36×104L/mol/cmd:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.035mlV樣總:加入提取液體積,1mlT:反應(yīng)時(shí)間,1min。W,樣本質(zhì)量,gCpr:上清液蛋白濃度,mg/ml;500:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù),500萬。

 


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