谷草轉氨酶（GOT）活性檢測試劑盒（可見分光光度法）

注意：正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定。

產品貨號：BA1113

產品規格：50管/24樣

產品簡介：

GOT（ 2.6.1.1）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，催化可逆轉氨基反應，是氨基酸代謝的重要酶。此外，GOT在心肌細胞中含量最高，臨床上一般常作為心肌梗塞和心肌炎的輔助檢查。肝臟損害時其血清濃度也可升高。

GOT催化α-酮戊二酸和天門冬氨酸發生轉氨基反應，生成谷氨酸和草酰乙酸，草酰乙酸進一步自行脫羧生成丙酮酸；丙酮酸可與2,4-二硝基苯肼反應生成2,4-二硝基苯腙，在堿性條件下顯棕紅色；測定505nm吸光度的變化，即可計算GOT酶活力。

產品內容：

提取液：液體30mL×1瓶，4℃保存；

試劑一：液體5mL×1瓶， 4℃保存；

試劑二：液體5mL×1瓶， 4℃保存；

試劑三：液體50mL×1瓶，4℃保存。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣品測定的準備

1.        細菌、細胞或組織樣品的制備：

細菌或培養細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（10⁴個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次）；8000g4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進行冰浴勻漿。8000g4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2.        血清（漿）樣品：直接檢測。

二、測定操作表

1.        分光光度計預熱30min以上，調節波長至505nm，蒸餾水調零。

2.        在EP管中加入下列試劑：

三、計算：

1.        以相對吸光值（A測定管-A對照管）為橫坐標，相應酶活力單位（U/L）為縱坐標。

作標準曲線為：y=（605.07χ2+192.86χ+0.1392）×0.482

2.        血清中GOT活力(U/L)=0.482×（605.07χ2+192.86χ+0.1392）。

χ為A測定管-A對照管。

3.        微生物、細胞或組織中GOT活力(U/g蛋白)=0.482×（605.07χ2+192.86χ+0.1392）÷待測勻漿蛋白濃度（g/L）。

χ為A測定管-A對照管。