白蛋白檢測試劑盒（溴甲酚綠微板法）

產品貨號: BA1553

產品規格:100T

產品簡介：

總蛋白(Total Protein，TP)由白蛋白和球蛋白組成，檢測白蛋白的方法有雙縮脲法、色氨酸法、染料結合法。檢測白蛋白的染料結合法可采用溴甲酚綠或溴甲酚紫染料結合，上述染料對白蛋白具有高度的親和力，通常監測染料與白蛋白結合的初速率，該速率與樣品中白蛋白濃度成正比。

尚寶生物 白蛋白檢測試劑盒(溴甲酚綠微板法)檢測原理是在酸性環境下，白蛋白分子帶正電荷，不帶負電荷的溴甲酚綠 (Bromocresol green，BCG)結合生成藍綠色復合物，在628nm處有吸收波，該復合物的吸光度與白蛋白濃度成正比，不同樣處理的白蛋白標準比較，求得待測樣品中白蛋白濃度。本試劑盒多用于人或動物血清、血漿、組織等樣本中的蛋白含量測定，該法操作簡單、方法特異，既可手工操作，又可采用自動分析儀檢測。本試劑盒僅用于科研領域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

產品組成：

自備材料：

1.        離心管、小試管

2.        96孔板

3.        酶標儀

操作步驟(僅供參考)：

1.        取0.5ml白蛋白標準配制液或稀釋液加入到白蛋白標準中，充分溶解后配制成40mg/ml的白蛋白標準溶液，配制后可立即使用，溶解后的白蛋白標準溶液應-20℃保存。特別提示：待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中，白蛋白標準也宜溶解于什么樣的稀釋液中。例如待測蛋白溶解于蔗糖中，亦取白蛋白標準溶解于蔗糖中。一般也可以用0.9%NaCl或PBS作為溶解白蛋白標準品的稀釋液。

2.        樣本處理：血清、血漿樣本直接取5μl檢測。對于組織樣本，按組織質量(g)：生理鹽水=1：9比例，加入9倍體積的生理鹽水或PBS，冰浴下勻漿后，2500g離心10min，取5μl上清待檢。

3.        白蛋白加樣操作，按下表依次加入試劑：

4.        先在酶標儀628nm處以空白管調零，逐管加入BCG試劑，并立即混勻。

5.        放置(30±3)s，讀取標準管和各待測管的吸光度。

6.        (備選步驟)當遇到脂血混濁，可設“樣本空白孔"：取5μl待測樣品加入250μlBCG空白試劑，以BCG空白試劑調零，讀取樣本空白孔吸光度。用待測孔吸光度減去樣本空白孔吸光度后的凈吸光度，計算白蛋白濃度。

計算：

白蛋白(g/L)=(待測孔吸光度/標準孔吸光度)×白蛋白標準液濃度(g/L)

參考區間 ：

4～14 兒童            38～54g/L

健康成年人            34～48g/L

注意事項：

1.        白蛋白標準粉末溶解于白蛋白標準配制液后，即獲得白蛋白標準原液，該原液中含有防腐劑，不影響后續檢測，該蛋白標準原液-20℃長期保存。

2.        如果沒有酶標儀，也可以使用分光光度計測定。使用分光光度計測定蛋白濃度時，每個試劑盒可以測定的樣品數量可能會顯著減少。

3.        本法線性范圍是10～60g/L。

4.        該法測定正常樣本的批間變異系數為6.3%。

有效期：12個月有效。白蛋白標準配制成溶液后應-20℃凍存。