硝態(tài)氮檢測(cè)試劑盒(水楊酸比色法)

產(chǎn)品貨號(hào)：BA1580

產(chǎn)品規(guī)格：100T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

硝態(tài)氮是植物最主要的氮源。植物體內(nèi)硝態(tài)氮含量反映了土壤中硝態(tài)氮的供應(yīng)情況，可作為土壤氮肥的指標(biāo)。測(cè)定植物體內(nèi)的硝態(tài)氮含量，不僅能夠反映出植物的氮素營(yíng)養(yǎng)情況，而且對(duì)鑒定蔬菜和以植物為原料的加工制品的品質(zhì)也有重要的意義。

硝態(tài)氮檢測(cè)試劑盒(水楊酸比色法)檢測(cè)原理是在強(qiáng)酸條件下，NO_3-與水楊酸反應(yīng)生成硝基水楊酸，后者在堿性條件下呈黃色，其顏色深淺與氮含量在一定范圍內(nèi)呈正比，以分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀測(cè)定410nm處吸光度，根據(jù)NO_3-反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線將A₅₂₀換算成NO_3-濃度，再依據(jù)上述關(guān)系式即可計(jì)算出硝態(tài)氮含量。該試劑盒主要用于測(cè)定植物組織、血液、組織樣本等中的硝態(tài)氮含量。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成

自備材料：

1. 蒸餾水

2. 實(shí)驗(yàn)材料：植物組織(大豆、玉米等葉柄)、血液等

3. 濃硫酸

4. 離心管或試管

5. 離心機(jī)

6. 比色杯

7. 分光光度計(jì)

操作步驟 (僅供參考) ：

1. 準(zhǔn)備樣品：

①植物樣品：取植物組織，清洗干凈，擦干，剪碎成1-2mm的碎片，加入蒸餾水，煮沸30min，冷卻至室溫，中速濾紙過濾，補(bǔ)水至，即為硝態(tài)氮提取液。

②血漿、血清和尿液樣品：血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于本試劑盒的測(cè)定，用于硝態(tài)氮的檢測(cè)。③高活性樣品：如果樣品中含有較高濃度的硝態(tài)氮，可以使用硝態(tài)氮裂解液或蒸餾水進(jìn)行恰當(dāng)?shù)南♂尅?/span>

2. 配制水楊酸工作液：按水楊酸：濃硫酸=的比例，把水楊酸溶解于濃硫酸，4℃避光保存，1周有效。注意：濃硫酸為強(qiáng)酸，請(qǐng)小心操作。

3. 配制系NO_3-標(biāo)準(zhǔn)溶液：取NO_3-標(biāo)準(zhǔn)（500μg/ml）按下表繼續(xù)稀釋：

4. NO3-加樣：按照下表設(shè)置空白管、標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的硝態(tài)氮濃度過高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定，樣品的檢測(cè)最好能設(shè)置平行管。

5. NO_3-測(cè)定：冷卻至室溫，以空白為對(duì)照，分光光度計(jì)(1cm光徑比色杯)或酶標(biāo)儀測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)管、測(cè)定管410nm處吸光度(A_{標(biāo)準(zhǔn)}、A_測(cè)定)。

計(jì)算：

以系列NO_3-標(biāo)準(zhǔn)(1-5號(hào)管)濃度(μg/ml)為橫坐標(biāo)，以對(duì)應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)，制定標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)測(cè)定管的吸光度進(jìn)而計(jì)算NO_3-含量。根據(jù)如下公式計(jì)算具體樣品中硝酸氮的含量：

植物組織樣品硝態(tài)氮(ug/g)=C×V/m

式中:C=從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的NO3-濃度(ug/ml)

V=硝態(tài)氮提取液的總體積(ml)

m=植物樣品重量(g)

血清、尿液等樣品硝態(tài)氮(ug/ml)=C×N×V_T/Vs

式中:C=從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的NO_3-濃度(ug/ml)

V_T=提取液的總體積(ml)。

N=稀釋倍數(shù)

Vs=測(cè)定時(shí)加入提取液體積(ml)

注意事項(xiàng):

1. 實(shí)驗(yàn)材料應(yīng)盡量新鮮，如取材后不立即使用，應(yīng)存于4℃。

2. NO_3- Assay buffer易揮發(fā)，請(qǐng)密閉保存。

3. 如果沒有分光光度計(jì)，也可以使用普通的酶標(biāo)儀測(cè)定，但應(yīng)考慮酶標(biāo)儀的最大檢測(cè)體積。

4. 所測(cè)樣本的濃度過高，應(yīng)用硝態(tài)氮裂解液或蒸餾水稀釋樣品后重新測(cè)定。

有效期：12個(gè)月有效。