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上海尚寶生物科技有限公司
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當(dāng)前位置:上海尚寶生物科技有限公司>>試劑盒>>染色試劑盒>> BA1802溶酶體β-半乳糖苷酶染色試劑盒

溶酶體β-半乳糖苷酶染色試劑盒

參  考  價(jià):780
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號(hào)

    BA1802

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

100T 780元 999盒 可售

更新時(shí)間:2022-03-09 16:11:54瀏覽次數(shù):377次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100T
貨號(hào) BA1802 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
溶酶體β-半乳糖苷酶染色試劑盒(Lysosomal β-Galactosidase Staining Kit)是一種對(duì)溶酶體中酸性β-半乳糖苷酶(Acid β-Galactosidase)進(jìn)行染色檢測(cè)的試劑盒,常用作細(xì)胞衰老檢測(cè)時(shí)的對(duì)照。在普通的光學(xué)顯微鏡下就可以觀測(cè)到細(xì)胞或組織中溶酶體酸性β-半乳糖苷酶的活力水平情況。本試劑盒可以用于培養(yǎng)細(xì)胞的檢測(cè),也可以用于組織切片的檢測(cè)。絕大多數(shù)正常細(xì)胞都可

溶酶體β-半乳糖苷酶染色試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào):BA1802

產(chǎn)品規(guī)格:100T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

溶酶體β-半乳糖苷酶染色試劑盒(Lysosomal β-Galactosidase Staining Kit)是一種對(duì)溶酶體中酸性β-半乳糖苷酶(Acid β-Galactosidase)進(jìn)行染色檢測(cè)的試劑盒,常用作細(xì)胞衰老檢測(cè)時(shí)的對(duì)照。在普通的光學(xué)顯微鏡下就可以觀測(cè)到細(xì)胞或組織中溶酶體酸性β-半乳糖苷酶的活力水平情況。本試劑盒可以用于培養(yǎng)細(xì)胞的檢測(cè),也可以用于組織切片的檢測(cè)。絕大多數(shù)正常細(xì)胞都可以檢測(cè)到較高水平的溶酶體β-半乳糖苷酶活性水平。可以用作細(xì)胞衰老β-半乳糖苷酶染色時(shí)的參考染色。細(xì)胞衰老特異的β-半乳糖苷酶僅在衰老時(shí)表達(dá),而溶酶體β-半乳糖苷酶幾乎在任何情況下都表達(dá)。

尚寶生物生產(chǎn)的溶酶體β-半乳糖苷酶染色試劑盒,以X-Gal為底物,在溶酶體酸性β-半乳糖苷酶的催化下會(huì)生成深藍(lán)色產(chǎn)物。從而在光學(xué)顯微鏡下很容易觀察到變成藍(lán)色的表達(dá)β-半乳糖苷酶的細(xì)胞或組織。本產(chǎn)品染色后的HeLa細(xì)胞請(qǐng)參考圖1

1. HeLa細(xì)胞使用本產(chǎn)品染色后的示例圖片。

本試劑盒僅染色溶酶體酸性β-半乳糖苷酶,不會(huì)染色衰老特異性的β-半乳糖苷酶,也不會(huì)染色外源轉(zhuǎn)染表達(dá)的用于報(bào)告基因的β-半乳糖苷酶(大腸桿菌的β-半乳糖苷酶)

主要特點(diǎn):本試劑盒經(jīng)過(guò)多方面的優(yōu)化,能兼容普通的細(xì)胞培養(yǎng)用多孔板、移液管等聚苯乙烯類(lèi)材質(zhì)耗材或容器的試劑盒。本試劑盒可以有效避免由于和多孔板、移液管等的不兼容導(dǎo)致的染色偏弱、染色效果不穩(wěn)定等情況。通常同類(lèi)試劑盒要求使用可高溫高壓滅菌的聚丙烯(polypropylene)材質(zhì)的耗材、容器或玻璃容器進(jìn)行溶液的配制,而不能使用普通的多孔板、移液管等聚苯乙烯(polystyrene)類(lèi)材質(zhì)的容器或耗材,否則可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀,影響實(shí)驗(yàn)觀察。即使嚴(yán)格按照要求操作,也會(huì)在染色時(shí)間比較長(zhǎng)的情況下,容易出現(xiàn)絮狀物沉淀(參考圖2)。本試劑盒經(jīng)過(guò)多方面的優(yōu)化,對(duì)耗材或容器的材質(zhì)無(wú)特殊要求,可以兼容普通的多孔板和移液管等常用耗材和容器。而且配制的工作液不會(huì)產(chǎn)生沉淀或不溶物,使用更加便捷。

國(guó)際同類(lèi)試劑盒  尚寶生物試劑盒

2. 本試劑盒優(yōu)化前后的對(duì)比圖。優(yōu)化前,X-Gal溶液直接接觸聚苯乙烯類(lèi)材質(zhì)的材料如移液管、多孔板等會(huì)產(chǎn)生明顯的腐蝕(A),使用聚苯乙烯容器配制染色工作液后,在顯微鏡下觀察有異常的絮狀不溶物(C);優(yōu)化后,X-Gal溶液直接接觸聚苯乙烯類(lèi)材質(zhì)的材料觀察不到有任何異常情況(B),使用聚苯乙烯容器配制染色工作液后,在顯微鏡下觀察也沒(méi)有任何異常情況(D)

如果使用6孔板檢測(cè),足夠測(cè)定100個(gè)樣品;使用24孔板測(cè)定,足夠測(cè)定400個(gè)樣品;使用96孔板測(cè)定,足夠測(cè)定1000個(gè)樣品。對(duì)于組織切片或組織塊,可以檢測(cè)的樣品數(shù)量視樣品的大小而定。對(duì)于普通切片的滴染足夠檢測(cè)100個(gè)樣品。

產(chǎn)品組成:

產(chǎn)品名稱(chēng)

100T

β-半乳糖苷酶染色固定液

100ml

X-Gal溶液

5ml

β-半乳糖苷酶染色液A

1ml

β-半乳糖苷酶染色液B

1ml

β-半乳糖苷酶染色液C

100ml

使用說(shuō)明:

1. 對(duì)于貼壁細(xì)胞:

a. 對(duì)于6孔板中培養(yǎng)的細(xì)胞,吸除細(xì)胞培養(yǎng)液,用PBSHBSS洗滌1次,加入1毫升β-半乳糖苷酶染色固定液,室溫固定15分鐘。對(duì)于其它類(lèi)型的培養(yǎng)板,固定液及后續(xù)溶液的用量參照此比例進(jìn)行操作。

b. 吸除細(xì)胞固定液,用PBSHBSS洗滌細(xì)胞3次,每次3分鐘。

c. 吸除PBSHBSS,每孔加入1毫升染色工作液。染色工作液的配制方法參考表1
1. 染色工作液的配制方法。

β-半乳糖苷酶染色液A

10μl

β-半乳糖苷酶染色液B

10μl

β-半乳糖苷酶染色液C

930μl

X-Gal溶液

50μl

d. 37℃孵育過(guò)夜,可以用parafilm或保鮮膜封住6孔板防止蒸發(fā)。

e. 普通光學(xué)顯微鏡下觀察。如不能及時(shí)觀察計(jì)數(shù),可以去除染色工作液,加入2毫升PBS4℃可以保存數(shù)天;或者加上封片液封片后,4℃可以保存較長(zhǎng)時(shí)間。

2. 對(duì)于懸浮細(xì)胞:

a. 離心收集細(xì)胞至1.5ml離心管內(nèi),用PBSHBSS洗滌1次,加入1毫升β-半乳糖苷酶染色固定液,室溫固定15分鐘。固定時(shí)可以在搖床上緩慢搖動(dòng),以避免細(xì)胞結(jié)成團(tuán)塊。

b. 離心,吸除細(xì)胞固定液,用PBSHBSS洗滌細(xì)胞3次,每次3分鐘。

c. 離心,吸除PBSHBSS,每管加入0.5-1毫升染色工作液。染色工作液的配制方法參考表1

d. 37℃孵育過(guò)夜。

e. 取部分染色后的細(xì)胞,滴加到載玻片上或6孔板內(nèi),普通光學(xué)顯微鏡下觀察。如不能及時(shí)觀察計(jì)數(shù),可以離心,去除染色工作液,然后加入1毫升PBS4℃可以保存數(shù)天。如果離心,取細(xì)胞用于涂片,加上封片液封片后,4℃可以保存較長(zhǎng)時(shí)間。

3. 對(duì)于組織切片:

a. 對(duì)于石蠟切片先按照常規(guī)方法進(jìn)行脫蠟和水化處理。對(duì)于冷凍切片直接按照以下步驟進(jìn)行。

b. 加入適當(dāng)體積的β-半乳糖苷酶染色固定液,以充分蓋住組織為宜,室溫固定不少于15分鐘。

c. PBS浸泡洗滌組織3次,每次不少于5分鐘。

d. 吸除PBS,加入適當(dāng)量的染色工作液。染色工作液的配制方法參考表1

e. 37℃孵育過(guò)夜,可以用parafilm或保鮮膜封住防止蒸發(fā)。最好把整個(gè)切片浸泡在染色工作液中。

f. 普通光學(xué)顯微鏡下觀察。如不能及時(shí)觀察,加上封片液封片后4℃可以保存較長(zhǎng)時(shí)間。

注意事項(xiàng)

1. β-半乳糖苷酶染色固定液對(duì)人體有毒、有腐蝕性,操作時(shí)請(qǐng)?zhí)貏e小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

2. X-Gal溶液在-20oC4oC保存會(huì)凍結(jié),室溫或37oC水浴2-5分鐘并適當(dāng)搖動(dòng)即可*融解。

3. β-半乳糖苷酶染色液B在剛剛?cè)芙夂髸?huì)觀察到有沉淀,屬正常現(xiàn)象,充分混勻或Vortex后,沉淀會(huì)全部溶解。作為常規(guī),試劑使用前必須確保沉淀全部溶解,并且混勻。

4. 使用96孔板等多孔板進(jìn)行檢測(cè)時(shí),如果孵育過(guò)夜容易產(chǎn)生所謂的邊緣效應(yīng)"(edge effect),即多孔板四周的孔由于和外界最直接接觸,易受外界環(huán)境影響,其中明顯的是四周細(xì)胞培養(yǎng)孔的蒸發(fā)效應(yīng)。邊緣效應(yīng)會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)不均勻、細(xì)胞分布不均一、培養(yǎng)液體積不一致、培養(yǎng)液中相關(guān)成分的濃度、pH值不一致。建議采取以下方法避免96孔板等多孔板的邊緣效應(yīng):避免孵育過(guò)長(zhǎng)時(shí)間,以避免蒸發(fā)等帶來(lái)的邊緣效應(yīng);棄用邊緣孔并在棄用的邊緣孔中加入等量的水、PBS或其他適當(dāng)溶液;在多孔板非孔的凹陷處加入適量的水或其他適當(dāng)溶液;將整塊板放在濕盒中;使用防揮發(fā)蓋;在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí),實(shí)驗(yàn)樣品最好進(jìn)行隨機(jī)分配,不要將某一組樣品固定放在某個(gè)位置而引入可能的系統(tǒng)性誤差。

5. 需自備PBSHBSS(Hanks Balanced Salt Solution)

6. 本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。

7. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

保存條件-20oC保存,一年有效。其中X-Gal溶液需避光保存



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