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細胞活力/毒性檢測試劑盒
(超高靈敏型 CCK-8 試劑盒)
超高靈敏型 CCK-8 細胞活力測定試劑盒是一種廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性相對定量及定量檢測的 快速、高靈敏度試劑盒,比傳統的 MTT、XTT 及 CCK-8 方法具有更好的檢測靈敏度和更寬的線性范圍。
產品優勢:
本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經配制好的超高靈敏型 CCK-8 溶液,無須再進行任何配制等操作。 無須使用同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊 96 孔板內完成。不必洗滌細胞,不必收集細胞,也不必采用額外 的步驟去溶解反應生成物,可用于大批量樣品的高通量檢測。
使用方法:
1. 使用 96 孔板,細胞培養和處理完畢。
2. 逐孔加入超高靈敏型 CCK-8 試劑,每孔 100μl 培養基中加入 10μl 超高靈敏型 CCK-8 試劑。
3. 培養板放回培養箱,37℃孵育 1~4 小時。
4. 于 490nm 處測定 OD 值。
5. 結果分析 將各測試孔的 OD 值減去對照孔 OD 值。各平行孔的 OD 值取平均數。 細胞活力% =(加藥細胞 OD-空白 OD)/(對照細胞 OD-空白 OD)×*
6. 若使用除 96 孔外的培養板,試劑用量按照培養基體積等比例增減。
使用注意事項:
1. 試劑加入后需輕輕振搖培養板,使超高靈敏型 CCK-8 試劑與培養基充分混勻。
2. 試劑加入后培養時間根據細胞種類的不同和每孔細胞數量的多少而異。對于貼壁細胞,加入超高靈敏型 CCK-8 的培養時間一般為 1~4 小時,但在培養 30 分鐘左右即可取出肉眼觀察顯色程度(根據細胞種類而定)。 與貼壁細胞相比,懸浮細胞較難顯色。對于懸浮細胞,在加入超高靈敏型 CCK-8 培養 1~4 小時后,可先從 培養箱中取出,目測染色程度或用酶標儀測定。若顯色困難,可以將培養板放回培養箱,繼續培養數小時后 再確定。
3. 如果實驗中有還原劑,需要檢查背景的 OD 值,即在不含細胞的培養基中加入藥物,然后加入超高靈敏型 CCK-8 試劑在一定時間內檢測,和不加藥物的培養基進行比較(只加超高靈敏型 CCK-8 試劑),如果 OD 值明顯偏高,則說明有反應。
4. 若細胞培養時間較長導致培養基顏色或pH發生變化,建議更換新鮮培養基后再加入超高靈敏型CCK-8試劑。 含有酚紅的培養基不影響本試劑的使用。
5. 如果樣品為高渾濁度的細胞懸液,建議設定 600nm(或 600nm 以上)作為參比波長,扣除參比波長的 OD 值即可。
6. 如果要測定細胞的具體數量,需要先做一個標準曲線。
7. 若測得 OD 值過高,可酌減鋪板細胞數或超高靈敏型 CCK-8 試劑用量。
8. 本試劑盒靈敏度高,相比傳統的 CCK-8 法及 MTT、XTT 法,建議起始細胞加樣數/培養數減半或更少,其 他實驗條件不變。如用 CCK-8 法時需加 4000 個細胞培養后檢測,用本試劑盒時僅需 2000 個細胞即可。
9. 實驗結束時,于 490nm 所測得 OD 值在 0.5-1.5 范圍內為佳。
試劑包裝:
100 次:1ml×1 瓶;
500 次:5ml×1 瓶;
3,000 次:5ml×6 瓶;
10,000 次:100ml×1 瓶;
貯藏條件:
超高靈敏型 CCK-8 在避光 0~5℃的條件下存放一年,測定效果*不變。在-20℃的條件下可以貯存更久。
本產品僅供科研使用,不做其它用途。
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