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高純度質(zhì)粒小提試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào)：26210

產(chǎn)品規(guī)格：50 次/100 次/200 次

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

  本試劑盒適合提取 1-5 ml 菌液，在堿裂解法裂解細(xì)胞的基礎(chǔ)上，采用*的硅基質(zhì)膜吸附技術(shù)和試劑配方， 通過(guò)離心吸附柱在高鹽狀態(tài)下高效專一的結(jié)合溶液中的質(zhì)粒 DNA，每個(gè)吸附柱可吸附 30 μg 的質(zhì)粒 DNA， 并更大限度的去除蛋白質(zhì)、基因組、RNA 和其他雜質(zhì)。得到的質(zhì)粒 DNA 可直接用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染、PCR、酶切、測(cè) 序、連接等生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

包裝清單：

自備試劑：

  使用前 Buffer PE 50 次加入 36ml 無(wú)水乙醇/100 次加入 72ml 無(wú)水乙醇/200 次加入 144ml 無(wú)水乙醇

操作步驟：

1. 取-5 ml 過(guò)夜培養(yǎng)的菌液加入離心管（自備）中，12000 rpm 離心 30 秒收集菌體沉淀，盡量吸棄上清。

2. 向留有菌體沉淀的離心管中加入 250μl Buffer P1，使用移液器或渦旋振蕩器充分混勻，懸浮菌體沉淀。 注意：如果菌塊未*混勻，將會(huì)影響裂解效果，導(dǎo)致提取量和純度偏低。

3. 向離心管中加入 250μl Buffer P2，溫和地上下顛倒混勻 4-6 次，充分混勻使菌體裂解，此時(shí)溶液應(yīng)變得清亮 粘稠。 注意：溫和混勻，不要?jiǎng)×艺鹗?，以免打斷基因組 DNA，造成提取的質(zhì)粒中混有基因組 DNA的片段。

4. 此步驟所用時(shí)間應(yīng)不超過(guò) 5 分鐘，避免質(zhì)粒受到破壞。

5. 向離心管中加入 350μl Buffer N3，立即溫和地上下顛倒混勻 8-10 次，充分混勻，此時(shí)應(yīng)出現(xiàn)白色絮狀沉淀。 12000 rpm 離心 5 分鐘。 注意：Buffer N3 加入后應(yīng)立即混勻，避免產(chǎn)生局部沉淀。

6. 將步驟 4 中所得的上清液轉(zhuǎn)移到已裝入收集管的吸附柱（Spin Columns）中，12000 rpm 離心 30 秒鐘，倒掉 收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。

7. 向吸附柱中加入 500μl Buffer PB，12000 rpm 離心 30 秒。

8. 向吸附柱中加入 750μl Buffer PE（請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇），12000 rpm 離心 1 分鐘，倒掉收集管中 的廢液。

9. 將吸附柱置于一個(gè)新的離心管（自備）中，向吸附膜的中間部位加入 50μl BufferEB，室溫放置 1 分鐘，12000 rpm 離心 1 分鐘，將質(zhì)粒溶液收集到離心管中。-20℃保存質(zhì)粒。