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血液基因組提取試劑盒（高鹽法）

產(chǎn)品貨號(hào)：28102

產(chǎn)品規(guī)格：50 次/100 次/200 次

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

  本試劑盒采用高鹽法提取血液中的基因組 DNA，可大限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有 機(jī)化合物。提 取的基因組 DNA 的片段大，純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠。 使用本試劑盒回收的 DNA 可適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、文庫(kù)構(gòu)建、Southern 雜交等實(shí)驗(yàn)。

包裝清單：

自備試劑：

使用前 Washing Buffer 試劑 50 次加入 40ml 無(wú)水乙醇/100 次加入 80ml 無(wú)水乙醇/200 次加入 160ml 無(wú)水乙醇

操作步驟：

以下步驟以提取 0.2ml 血液中基因組為例，具體實(shí)驗(yàn)可根據(jù)血液量等比例減少。

1. 于離心管中加入 0.2ml Buffer A 和 0.2ml 預(yù)冷的超純水。上下顛倒 6-8 次，冰上孵育 2-3min；

2. 3500rpm 離心 15min，棄上清；

3. 于沉淀中加入 0.2ml 的 Buffer A 及 0.6ml 的超純水，渦旋 30s，3500rpm 離心 15min，棄上清；

4. 重復(fù)步驟 2-3；

5. 于沉淀中加入 0.5ml Buffer B，50μl SDS Solution 溶液，劇烈渦旋 30-60s 至沉淀重懸，加入 5μLProteinase K 溶液；

6. 充分顛倒混勻，56℃放置 0.5-2h，其間顛倒混勻數(shù)次，溶液應(yīng)變清亮（如溶液未*變清亮，請(qǐng)延長(zhǎng)裂解時(shí) 間至溶液清亮為止）。 注意：加入緩沖液 Buffer B 時(shí)可能會(huì)產(chǎn)生白色沉淀，一般 37℃放置時(shí)會(huì)消失，不會(huì)影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如溶液未變 清亮，說(shuō)明細(xì)胞裂解不*，可能導(dǎo)致提取 DNA 量少和提取出的 DNA 不純，需等比例補(bǔ)加 Buffer B 及 Proteinase K。

7. 將離心管冰上孵育 2-3min 至冷卻，加入 High Salt Buffer0.4ml，劇烈渦旋 15s；

8. 12000rpm 離心 5min，將上清收集于一新的離心管中，加入等體積預(yù)冷的異丙醇，上下顛倒 5-6 次以沉淀析 出 DNA；

9. 12000rpm 離心 10min，吸棄上清，加入 1ml Washing Buffer ，輕輕吹起沉淀后 12000rpm 離心 10min，吸棄 上清。

10. 將離心管室溫干燥，加入 20-50μl Buffer EB 重新溶解沉淀 DNA。-20℃保存 DNA。

注意事項(xiàng)：

1. *使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說(shuō)明在 Buffer PW 中加入無(wú)水乙醇。

2. 若 Buffer B 中有沉淀，可在 37℃水浴中重新溶解，搖勻后使用。

3. 所有離心步驟均可室溫下進(jìn)行。