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DNA 純化試劑盒
產品貨號:27100
產品規格:50 次/100 次/200 次
產品簡介: 本試劑盒采用新型硅基質膜技術和試劑配方,通過快速簡單的結合-洗滌-洗脫三步即可從 PCR 產物或酶反應 液(酶切,連接,探針標記等)中純化回收 70 bp-30 kb 的 DNA 的片段,每個吸附柱可吸附 10μg 的 DNA,同 時更大限度的去除引物、寡核苷酸、酶等雜質。純化回收的 DNA 純度及濃度高,完整性好,回收率高,可直接 用于測序、連接和轉化、標記、體外轉錄等分子生物學實驗。
包裝清單:
產品名稱 | 50次包裝 | 100次包裝 | 200次包裝 | 儲存條件 |
---|---|---|---|---|
Buffer PG | 15ml | 30ml | 55ml | 室溫 |
Buffer PS | 15ml | 25ml | 45ml | 室溫 |
Buffer PW | 10ml | 18ml | 36ml | 室溫 |
Buffer EB | 5ml | 10ml | 20ml | 室溫 |
Spin Columns | 50個 | 100 個 | 200 個 | 室溫 |
Collection Tubes | 50個 | 100 個 | 200 個 | 室溫 |
自備試劑:50 次自備 36ml 無水乙醇/100 次自備 72ml 無水乙醇/100 次自備 144ml 無水乙醇
操作步驟:
1. 將估計 DNA 反應液的體積,加入 5 倍體積的 Buffer PG,充分混勻(無需去除石蠟油或礦物油)。 注意:如 DNA 反應體系為 50µl(不包括石蠟油體積),則加入 250 µl Buffer PG。
2. 柱平衡:向已裝入收集管(Collection Tubes)中的吸附柱(Spin Columns)中加入 200μl Buffer
3. PS,12000 rpm 離心 1 分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
4. 將步驟 3 或 4 所得溶液加入到已裝入收集管的吸附柱中,室溫放置 2 分鐘,12000 rpm 離心 1 分鐘,倒掉收 集管中的廢液,將吸附柱放回收集管中。
5. 向吸附柱中加入 450 μl Buffer PW(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000 rpm 離心 1 分鐘,倒掉收 集管中的廢液,將吸附柱放回收集管中。 注意:如果純化的 DNA 用于鹽敏感的實驗(例如平末端連接或直接測序),建議加入 Buffer PW 靜置 2-5 分鐘再離心。
6. 重復步驟 4。
7. 12000 rpm 離心 1 分鐘,倒掉收集管中的廢液。
注意:這一步的目的是將吸附柱中殘余的乙醇去除,乙醇的殘留會影響后續的酶促反應(酶切、PCR 等)。 將吸附柱放到一個新的 1.5 ml 離心管(自備)中,向吸附膜中間位置懸空滴加 50μlBuffer EB,室溫放置 2 分鐘。 12000 rpm 離心 1 分鐘,收集 DNA 溶液。-20℃保存 DNA。
注意事項:
1. *使用前應按照試劑瓶標簽的說明在 Buffer PW 中加入無水乙醇。
2. 所有離心步驟均可室溫下進行。
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