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桿粒提取試劑盒

Bacmid Extraction Kit

產品貨號：P0123

產品規格：100 次/200 次 

產品簡介：

  適用于大量從DH10Bac轉化株提取重組桿粒pFastBac。純化后的桿粒DNA使用PCR檢驗或者進行轉染。

產品內容:

操作步驟：

1. 5ml 離心管 12000rpm 離心 1min 收集細胞。

2. 真空吸干上清，0.3ml 的 Solution 1 重懸沉淀，輕輕地震蕩或上下混勻。

3. 0.3ml 的 Solution 2 輕輕混勻，室溫孵育 5min。注意：懸浮的沉淀應該從渾濁到幾乎半透明。

4. 緩慢加入 0.3ml KAC，加入過程中輕輕混勻，冰上放置 5-10min。

5. 12000rpm 離心 10min。

6. 輕輕將上清轉移到含有 0.8ml 異丙醇的離心管，不要吸到白色沉淀，顛倒混勻，冰上孵育 5-10min。

7. 室溫 12000rpm 離心 15 min。

8. 小心棄去上清，不要浮起沉淀，加入 0.5ml Wash Buffer，顛倒離心管數次清洗沉淀。

9. 室溫 12000rpm 離心 5 min。重復 8 和 9。

10. 輕輕吸棄上清，室溫 5-10 min 干燥沉淀，不要過分干燥。注意：勿使用真空離心選裝蒸發儀去干燥 DNA。

11. 40μl End Solution重新溶解DNA沉淀，為避免剪切，勿機械重懸DNA，讓溶液順管子輕輕流下溶解DNA。

注意事項：

1. 不*純化的桿粒 DNA 存在-20℃，因為反復凍融會剪切 DNA。

2. 分析重組桿粒 DNA（PCR 鑒定重組桿粒 DNA）或轉染昆蟲細胞。