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細胞膜蛋白、胞漿蛋白/核蛋白提取試劑盒

產品貨號：26141

產品規格：50次/100次

產品簡介：

  本試劑盒用于分離提取真核細胞的細胞膜蛋白、胞漿蛋白/核蛋白。

產品內容：

操作步驟：

1. 收集 10 6-5×10 6 個細胞于 1.5ml 離心管中，用 PBS 清洗。

2. 將細胞重新懸浮于 250-500μl Harvest buffer 中，冰上孵育 5min。

3. 1000rpm 離心 10min，收集上清至新離心管中，同時留沉淀。

4. 12000rpm 離心 15min，收集上清至新離心管中（此部分溶液包含胞漿蛋白和膜蛋白）。

5. 將步驟 3 中沉淀重懸于 500μl Buffer A 中，1000rpm 離心 5min，棄上清。

6. 加入 4 倍體積 Buffer C，4℃渦旋（或反復渦旋/冰上孵育）15min。

7. 4℃，12000rpm 離心 10min。 8. 收集上清至新離心管中（此部分溶液包含核蛋白）。

注意事項：

1. 需自備 PMSF。PMSF 一定要在抽提試劑加入到樣品中前 2-3min 內加入，以免 PMSF 在水溶液中很快 失效。PMSF 可以向本公司訂購。

2. 抽提蛋白的所有步驟都需在冰上或 4ºC 進行。

3. 本試劑盒對于細胞樣品，僅適合于真核細胞。

4. 使用本試劑盒抽提到的蛋白可直接用本公司生產的 BCA 蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度。但不適合 用 Bradford 法測定蛋白濃度。

5. 本產品*于專業人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于 普通住宅內。

6. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。