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Hoechst 33342 /PI細胞凋亡染試劑盒
產品貨號:R21807
產品規格:100T
產品簡介:
尚寶生物生產的細胞凋亡熒光 Hoechst 33342 /PI 雙染試劑盒為您提供了一種經典而又快速簡便的細 胞凋亡與細胞壞死檢測方法。本試劑盒采用 Hoechst 33342 和碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)雙染的方 法。細胞發生凋亡時,染色質會固縮。Hoechst33342 可以穿透細胞膜,染色后凋亡細胞熒光會比正常細胞 明顯增強。碘化丙啶(PI)不能穿透細胞膜,對于具有完整細胞膜的正常細胞或凋亡細胞不能染色。而對于 壞死細胞,其細胞膜的完整性喪失,碘化丙啶(PI)可以染色壞死細胞。上述兩種染料雙染后,使用流式細 胞儀或熒光顯微鏡檢測時,正常細胞為弱紅色熒光+弱藍色熒光,凋亡細胞為弱紅色熒光+強藍色熒光, 壞死細胞為強紅色熒光+強藍色熒光。參考下圖,左圖為誘導凋亡前的正常細胞,右圖為誘導凋亡后的細 胞。
染色快速方便,兩種染料的染色僅需 20-30 分鐘,一步染色即可完成。使用方便,使用流式細胞儀檢測 時,無需稀釋等配制過程,也無需再準備其它任何溶液。本試劑盒足夠檢測 100 個樣品,每個樣品的細胞 數量可以為 1×10 5-1×10 6。
產品內容:
產品名稱 | 100T | 500T |
---|---|---|
細胞染色緩沖液 | 100ml | 500ml |
Hoechst 染色液 | 0.5ml? | 2.5ml |
PI 染色液 | 0.5ml | 2.5ml |
操作步驟:
1. 每個樣品收集約 10-100 萬細胞于 1.5ml 離心管內,離心棄上清。細胞沉淀用 0.8-1ml 細胞染色緩沖液 重懸。
2. 加入 5 微升 Hoechst 染色液。
3. 加入 5 微升 PI 染色液。
4. 混勻,冰浴或 4℃孵育 20-30 分鐘。
5. 用流式細胞儀檢測紅色熒光和藍色熒光。
6. 如果使用熒光顯微鏡檢測,檢測前離心沉淀細胞,用 PBS 洗滌一次,再涂片觀察紅色熒光和藍色熒光。 對于貼壁細胞使用熒光顯微鏡檢測,可以不收集細胞,直接依次按照上述比例加入細胞染色緩沖液、Hoechst 染色液和 PI 染色液冰浴或 4℃染色 20-30 分鐘。染色后 PBS 洗滌一次,再在熒光顯微鏡下觀察。
注意事項:
1. 需使用流式細胞儀進行紅色和藍色雙熒光檢測。也可使用熒光顯微鏡檢測。
2. 染色后宜盡快檢測。
3. Hoechst 33342 對人體有害,碘化丙啶(PI)對人體有刺激性,請注意適當防護。
4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
保存條件:
4℃保存六個月有效,-20℃保存一年有效。Hoechst 染色液和 PI 染色液需避光保存
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