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5×蛋白上樣緩沖液(含DTT)
產品貨號:T15257
產品規格:10ml
產品簡介:
本產品適用于SDS-PAGE(SDS-變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)時作蛋白質上樣用。其主要成份為SDS,DTT,溴 酚藍,緩沖鹽溶液等。SDS可與蛋白質結合使蛋白質-SDS復合物上帶有大量的負電荷,這時蛋白質本身的電荷完 全被SDS掩蓋,消除了各種蛋白質本身電荷的差異;SDS還可以斷開分子內和分子間的氫鍵,破壞蛋白質分子的 二級和三級結構。DTT可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質結構,消除了蛋白結構之間的差異。 終無電荷及結構上差異的蛋白(亞單位),電泳速度只是與其分子量大小有關。溴酚藍用作電泳時的指示劑,可大概指示電泳結束的時間。
操作步驟(僅供參考):
1. 請按每40μL蛋白樣品加入10μL上樣緩沖液的比例(5倍稀釋)來使用。如果蛋白樣品濃度過高,可用雙蒸水稀釋。
2. 混勻后,100℃水浴加熱5-10分鐘,使蛋白變性。
3. 冷卻至室溫后,10000-14000rpm離心2-5分鐘,取上清直接上樣電泳即可。
注意事項:
1. 聚丙烯酰胺凝膠濃度為8%時溴酚藍指示條帶的位置大概在30kd左右,膠濃度為12%時,約在20kd左右,膠 濃度為15%時,大概在10kd。請根據自己目的條帶來判斷電泳時間。
2. 本試劑因含DTT,有一定的毒性,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
3. 蛋白上樣緩沖液含有溴酚藍指示劑,PH 值受保存溫度影響,在低溫凍存狀態下,溶液可能會呈現深棕色, 不影響產品使用。
保存條件:
? -20℃保存,建議分裝凍存,避免反復凍融,自發貨之日起至少12個月有效。
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