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Carazzi 蘇木素染色液
產(chǎn)品貨號:G3212
產(chǎn)品規(guī)格:100ml/500ml
產(chǎn)品簡介:
蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色簡稱 HE 染色,是病理學和組織學常用的一種染色方法。蘇木 精為堿性天然染料,可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質的主要成分是 DNA,在 DNA 的雙螺旋結構中,兩條核苷 酸鏈上的磷酸基向外,使 DNA 雙螺旋的外側帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵 或氫鍵結合而被染色。
Leagene Delafield 蘇木素染液非常穩(wěn)定,成熟后密封可保存 2 年。對核染色質染得很清晰細致,染色時間也 稍長。適用于教學和科研上的制片染色,用此染色液對冷凍切片染色則不理想。
染色原理:
1、 細胞核染色的原理:
蘇木素為堿性天然染料,可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質的成分主要是 DNA,在 DNA 雙螺旋結構中,兩 條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使 DNA 雙螺旋的外側帶負電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以 離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色,所以細胞核被染成藍色。
2、 細胞漿染色的原理:
伊紅是一種化學合成的酸性染料,在一定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質,為兩性化合 物,細胞漿的染色與染液的 pH 值密切相關。當染液的 pH 值在胞漿蛋白質等電點(4.7~5.0)以下時,胞漿蛋白質 以堿式電離,則細胞漿帶正電荷,就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子,與胞 漿蛋白質帶正電荷的陽離子結合,使細胞漿著色,呈現(xiàn)紅色。
3、 分化作用:
染色后,用某些特定的溶液將組織過多結合的染色劑脫去,這個過程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。 在 HE 染色中常用鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木素的醌型結構,使組織與色素分離而退色。經(jīng)蘇木素染 色后,必須用鹽酸乙醇分化,使細胞核過多結合的蘇木素染料和細胞漿吸附的蘇木素染料脫去,再進行伊紅染色, 才能保證細胞核與細胞漿染色的分明。
4、 返藍作用:
分化之后,蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),呈紅色;在堿性條件下處于藍色離子狀態(tài),呈藍色。組 織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色,故分化之后,立即用水除去組織切片上的酸而中止分化,再用弱堿性 水使蘇木素染上的細胞核呈現(xiàn)藍色,這個過程稱為返藍作用或藍化作用。另外用自來水浸洗也可使細胞核返藍, 但所需時間較長。
產(chǎn)品組成:
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
---|---|---|
Delafield蘇木素染色液 | 100ml/500ml | 室溫,避光 |
自備材料:
1. 鹽酸乙醇分化液
2. 藍化液,如稀氨水、碳酸鋰溶液等
3. 系列乙醇
4. 伊紅染色液
5. 4%多聚甲醛
操作步驟:
(一) 石蠟切片染色
1. 切片脫蠟至水
① 二甲苯作用。
② (可選)無水乙醇作用。
③ 95%的乙醇
④ 90%的乙醇
⑤ 80%的乙醇
⑥ 自來水或蒸餾水沖洗
2. 染色
① Delafield 蘇木素染色液染色
② 自來水或蒸餾水沖洗
③ (可選)鹽酸乙醇分化
④ 自來水沖洗
⑤ (可選)藍化液返藍
⑥ 自來水沖洗
⑦ 伊紅染色液染色
注意事項:
1. 切片脫蠟應盡量干凈。系列乙醇應經(jīng)常更換新液。
2. 鹽酸乙醇分化時間應根據(jù)切片厚薄、組織類別以及新舊而定,另外分化后自來水沖洗時間應該足夠,以便徹 底清洗酸。
3. 藍化液常使用 0.2~1%氨水或 Scott 促藍液或 0.1~1%碳酸鋰溶液。
4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:24個月有效。
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