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EDTA脫鈣液
產品貨號:E1135
產品規格:100ml/500ml
產品說明:
一些組織內含有骨質或鈣化灶時,含鈣的組織不宜直接用石蠟包埋切片。這是因為鈣和石蠟之間的密度不同,較難切除完整的切片。對含鈣組織最好固定之后,再進行脫鈣或二者同時進行。然后進行下游的實驗,如脫水、透明、浸蠟、包埋、切片。用于脫鈣的試劑很多,脫鈣劑包括有機酸、無機酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及電解法脫鈣。?
EDTA是一種相對較好的螯合脫鈣劑,對組織結構影響最小,可以較好的保存組織的某些酶類,經EDTA脫鈣后的組織可以進行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太慢,一般脫需要數周至數月。?
EDTA脫鈣液優點:①經EDTA脫鈣的組織染色結果好;②對組織的結構損害小;③用化學方法測試可以確定脫鈣的終點。?
缺點:①脫鈣速度很慢,不適合常規標本脫鈣使用;②脫鈣后組織會稍微變硬。
產品組成:
試劑名稱 | 規格 | 保存條件 |
EDTA脫鈣液 | 100ml/500ml | 室溫 |
主要成分:主要由EDTA、磷酸鹽等組成,用NaOH溶液調pH值為7.2。
自備材料:?
1. PBS。
2. 蒸餾水。
3. 加熱裝置或微波爐。
操作步驟(僅供參考):
1. 骨組織脫鈣時,取材不易過厚,一般大約5mm。?
2. 組織固定后,用PBS清洗3次,每次20min。
3. 組織用蒸餾水洗清洗3次,每次20min。?
4. 組織轉移至20~30倍體積的EDTA脫鈣液中,脫鈣10~30天或更長時間。如果想加快脫鈣速度,可以置于37℃進行脫鈣。如果必要,更換新的EDTA脫鈣液繼續脫鈣,多數組織脫鈣2周~3個月即可,每周更換一次,直至終點。亦可采用微波快速脫鈣法:微波爐設在200W左右的檔位,每次加熱5min,依據組織厚度和密度重復3~5min,中間間隔3~5min。?
5. 用蒸餾水沖洗數次。?
6. 常規脫水、包埋。
注意事項:
1. 厚度5mm的骨組織塊脫鈣時間一般脫鈣10~30天即可。?
2. 適當加溫能加快脫鈣的速度,一般不應超過37~40℃,溫度過高容易使骨組織造成松散解體,尤其不可大于60℃。脫鈣應*,防止脫鈣不足或過度。脫鈣程度應控制在不影響組織切片的同時盡量縮短脫鈣時間,以免脫鈣過長引起組織損害。?
3. 脫鈣用具避免使用金屬容器,盡量使用玻璃容器。?
4. 骨組織脫鈣應先固定后脫鈣或脫鈣固定同時進行,不應先脫鈣后固定,以便減少組織的損傷程度。?
5. 每隔一段時間檢測一次脫鈣程度,避免脫鈣過度,脫鈣過度會增加組織的損傷程度,影響染色結果。?
6. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期: 12個月有效。
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