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植物基因組DNA提取試劑盒(CTAB粗提法)
產品貨號:11130
產品規格:50T/100T
產品簡介:
從植物組織中制備基因組DNA較常采用的方法有氯化離心法、CTAB抽提法等。CTAB抽提法是經典迅速的植物DNA提取法,可以用于多種不同類型植物樣品DN A的提取,獲得的量很高,但是純度一般,但是足夠用于大多數分子生物學實驗。
尚寶生物 植物基因組DNA提取試劑盒(CTAB粗提法)是簡單快速簡便的提取植物總DNA的試劑盒,先將新鮮植物樣本研磨破碎細胞壁,加入CTAB抽提液使細胞膜破裂同時將核酸與植物多糖等雜質分開。該試劑盒中CTAB抽提液的有效成分為CTAB(十六烷基三乙基溴化銨),經蛋白清除液等去除蛋白,即可獲得植物基因組DNA,可進行酶切、PCR等下游實驗。
產品組成:
名稱 | 50T | 100T | 保存條件 |
試劑(A): CTAB抽提液 | 250ml | 500ml | 室溫 |
試劑(B): 2- M E | 5ml | 10ml | 室溫,避光 |
試劑(C): DNA沉淀液 | 250ml | 500ml | 室溫 |
試劑(D): DNA洗滌液 | 250ml | 500ml | 室溫 |
試劑(E): TE buffer | 10ml | 20ml | 室溫 |
自備材料:
1. 液氮研缽或勻漿器
2. 離心管、離心機
3. 恒溫箱或水浴鍋
4. 氯仿異戊醇(24:1)
操作步驟(僅供參考):
1. 取5ml或適量的CTAB抽提液,按CTAB抽提液:2- M E = 50:1的比例混勻,置于15 ml或其他規格的離心管中,60℃預熱。
2. 稱取1.0~1.5g或適量新鮮植物組織或葉片,用預冷的液氮或干冰冷卻研缽或勻漿器,將新鮮植物組織或葉片粉碎成細粉末,將冷凍的組織轉移至離心管中。
3. 向粉碎后的組織中加入預熱的CTAB抽提液,充分混勻,65℃溫育30~60min,并不時混勻。
4. 加入等體積氯仿異戊醇(24:1),輕輕顛倒混勻,8000g離心8 min,回收上層水相(即上清液,該上清液中含有所需DNA)。
5. 轉移上清液至新的離心管中,加入1/2~2/3體積預冷的DNA沉淀液,輕輕混勻,室溫靜置使核酸沉至管底。如果觀察不到沉淀,可在室溫下靜置數小時至過夜。
6. 2000g離心2min,輕輕棄上清液。
7. 在松散的DNA沉淀物上加入DNA洗滌液(如果使用1.5ml離心管,加入1ml洗滌液,如果15ml離心管,加入8-10ml洗滌液),室溫靜置20min,4000g離心10min,輕輕棄上清液。
8. 自然干燥DNA,加入10~20μ l TE buffer,-20℃保存。注意:TE buffer體積越大,DNA濃度越低。
注意事項:
1. 如果每次的使用量很小,可以適當分裝后再使用。
2. 用于裂解植物組織或葉片越新鮮,裂解越好、收獲量越大。
3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:12個月有效。
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