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蔗糖溶血檢測試劑盒(比色法)
產(chǎn)品貨號:BA1756
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品簡介:
紅細(xì)胞(Red blood cell,RBC)也稱紅血球,是血液中數(shù)量最多的一種血細(xì)胞,脊椎動物體內(nèi)通過RBC運(yùn)送氧氣,RBC同時還具有免疫功能。在貧血檢查中,可通過蔗糖水溶血試驗來檢測紅細(xì)胞膜的缺陷,尤其適用于檢測陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥 (paroxysmal nocturnal hemoglobinuria, PNH)。該癥為獲得性紅細(xì)胞膜缺陷引起的慢性血管內(nèi)溶血,常在睡眠時加重,可伴發(fā)性血紅蛋白尿和全血細(xì)胞減少。
尚寶生物 蔗糖溶血檢測試劑盒(比色法)采用光電比色法,是利用含蔗糖溶液的低離子強(qiáng)度孵育紅細(xì)胞,可大大促進(jìn)補(bǔ)體與紅細(xì)胞膜的結(jié)合,使對補(bǔ)體敏感的紅細(xì)胞膜上形成小孔,蔗糖水進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)引起紅細(xì)胞膜破裂,使PNH對補(bǔ)體敏感的紅細(xì)胞溶血。該試劑盒主要用于檢測人、動物血液的紅細(xì)胞膜的缺陷,尤其用于鑒定陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥,用光電比色法求出溶血百分比。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 儲存條件 |
試劑(A): PNH NaCl buffer | 10ml | 室溫 |
試劑(B): 蔗糖鹽溶液 | 10ml | -20℃ |
試劑(C): Alkaline buffer | 2×30ml | 室溫 |
自備材料:
1. 生理鹽水
2. 蒸餾水或去離子水
3. 不患者同血型的正常新鮮血清
4. 水浴鍋
操作步驟:
1. 制備50%紅細(xì)胞懸液:取抗凝血,經(jīng)生理鹽水洗滌2~3次,用PNH NaCl buffer重新懸浮紅細(xì)胞。
2. 制備蔗糖鹽工作液:按蔗糖鹽溶液:去離子水=1:4稀釋,即為蔗糖鹽工作液。
3. 按下表進(jìn)行操作:
加入物(ml) | 1 | 2 | 3 | 4 |
蔗糖鹽工作液 | 0.9 | 0.95 | 0.95 | - |
50%紅細(xì)胞懸液 | 0.05 | 0.05 | - | 0.05 |
待測血清 | 0.05 | - | 0.05 | - |
Alkaline buffer | - | - | - | 0.95 |
4. 室溫孵育1h,分別加入生理鹽水4ml,低速離心,取上清。
5. 以蒸餾水做空白對照,分光光度計或酶標(biāo)儀于540nm處檢測吸光度,分別命名為A 1 、A 2 、A 3 、A 4 。
溶血%={A1 - (A2 + A3 )}/(A4 + A2 )×100%
參考區(qū)間 :
正常人無溶血,第一管溶血率<5%
注意事項:
1. 所用器具必須潔凈干燥,以免溶血造成假陰性。
2. 蔗糖溶液一旦出現(xiàn)污染,應(yīng)棄用。
3. 如果正常血清所含補(bǔ)體系統(tǒng)異常,可出現(xiàn)假陰性。
4. 假陽性:溶血一般不超過5%,可見于自身免疫性溶血性貧血等疾病。如果加入血清量過多,亦可出現(xiàn)假陽性。
5. 該實驗可作為 PNH 的過篩實驗,陰性可排除PNH,陽性應(yīng)做酸化溶血實驗證實。
保存條件:12個月有效。
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