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BA1547-50-5'-核苷酸檢測試劑盒過碘氧化法
  • BA1547-50-5'-核苷酸檢測試劑盒過碘氧化法
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貨物所在地:上海上海市

地: 上海

更新時間:2024-12-19 11:40:38

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5'-核苷酸檢測試劑盒過碘氧化法
核酸(nucleic?acid)是由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,是生命的基本物質之一,廣泛存在于所有動植物細胞、微生物體內,根據化學組成不同,核酸可分為脫氧核糖核酸(簡稱DNA)和核糖核酸(簡稱RNA)。

5′-核苷酸檢測試劑盒(過碘氧化法)

產品貨號:BA1547

產品規格:50T

產品簡介:

核酸(nucleic?acid)是由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,是生命的基本物質之一,廣泛存在于所有動植物細胞、微生物體內,根據化學組成不同,核酸可分為脫氧核糖核酸(簡稱DNA)和核糖核酸(簡稱RNA)。

5′-核苷酸檢測試劑盒(過碘氧化法)檢測原理是無機磷與鉬酸銨形成黃色的磷鉬酸銨,隨后還原劑把高價鉬離子還原成低價鉬離子,進而形成藍色的鉬藍,在一定濃度范圍藍色深淺與磷含量成正比,在660nm處檢測吸光度,通過檢查標準曲線,獲得磷含量。同時為了消除其他無機磷的干擾,測定未經過碘酸氧化的無機磷,予以扣除,即為準確的5′-核苷酸磷。該試劑盒的特點是專一測定5′-核苷酸。本試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。

產品組成:

產品組成

50T

保存條件

試劑(A):磷標準(1mg/ml

1ml

4

試劑(B):樣品處理液

10ml

4℃,避光

試劑(C):玻璃珠

50

室溫,避光

試劑(D):H2O2

2×1ml

室溫,避光

臨用前,按E1E2E3=311配制定磷試劑,即配即用。

試劑(F):過碘酸試劑

3ml

4℃,避光

試劑(G):NA assay buffer

15ml

室溫,避光

操作步驟(僅供參考)

1.        稀釋標準品:取磷標準(1mg/ml),按磷標準(1mg/ml):蒸餾水=199的比例稀釋標準品至10μg/ml。取干凈離心管或試管,按下表進行標準品濃度的依次稀釋,獲得不同濃度的多個磷標準。


1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

磷標準(10μg/ml/ml

0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

0.6

0.7

0.8

0.9

1.0

蒸餾水/ml

0.9

0.8

0.7

0.6

0.5

0.4

0.3

0.2

0.1

0

磷含量/(μg/ml

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

2.        制備待測樣液:取用粗AMP水解液或RNA水解液,作為待測樣液。

3.        磷測定:按下表進行操作,依次加入下列溶液,不能顛倒,每加一種試劑,必須充分混勻。如果樣品中有無機磷,應同時檢測無機磷,并將無機磷扣除。


空白管

標準管

氧化管

未氧化管

蒸餾水

1.0

-

0.5

0.5

系列磷標準(0-10號)/ml

-

0.5

-

-

待測樣液/ml

-

-

0.5

0.5

過碘酸試劑/ml

0.05

0.05

0.05

0.05

NA assay buffer/ml

0.2

0.2

0.2

0.2

混勻,45℃孵育10min

NA 顯色液/ml

0.25

0.25

0.25

0.25

混勻,孵育

定磷試劑/ml

1.5

1.5

1.5

1.5

4.        孵育,以空白管調零,比色杯光徑1.0cm,分光光度計測定660nm處吸光度(即為A660),分別為A氧化、A未氧化。

計算:

 以磷含量(μg/ml)為橫坐標,吸光度為縱坐標作圖,得標準曲線。氧化管為樣液中所有磷的含量,未氧化管為樣液未氧化前無機磷的含量,二者只差即為樣液中5′-核苷酸磷含量。

按下列公式計算樣液中5′-核苷酸的含量:

5′-

核苷酸含量(mg/ml=CM/31)×(N/1000


注意事項:

1.        上述低溫試劑避免反復凍融,以免失效或效率下降。

2.        待測樣本如不能及時測定,應置于2~8℃保存,3天內穩定。

3.        如果樣品濃度過高,應用蒸餾水稀釋后重測,結果乘以稀釋倍數。

有效期:6個月有效。



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