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5′-核苷酸檢測試劑盒（過碘氧化法）

產(chǎn)品貨號：BA1547

產(chǎn)品規(guī)格：50T

產(chǎn)品簡介：

核酸(nucleic?acid)是由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物，是生命的基本物質(zhì)之一，廣泛存在于所有動(dòng)植物細(xì)胞、微生物體內(nèi)，根據(jù)化學(xué)組成不同，核酸可分為脫氧核糖核酸(簡稱DNA)和核糖核酸(簡稱RNA)。

5′-核苷酸檢測試劑盒(過碘氧化法)檢測原理是無機(jī)磷與鉬酸銨形成黃色的磷鉬酸銨，隨后還原劑把高價(jià)鉬離子還原成低價(jià)鉬離子，進(jìn)而形成藍(lán)色的鉬藍(lán)，在一定濃度范圍藍(lán)色深淺與磷含量成正比，在660nm處檢測吸光度，通過檢查標(biāo)準(zhǔn)曲線，獲得磷含量。同時(shí)為了消除其他無機(jī)磷的干擾，測定未經(jīng)過碘酸氧化的無機(jī)磷，予以扣除，即為準(zhǔn)確的5′-核苷酸磷。該試劑盒的特點(diǎn)是專一測定5′-核苷酸。本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成：

操作步驟(僅供參考)：

1.        稀釋標(biāo)準(zhǔn)品：取磷標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)，按磷標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)：蒸餾水=1：99的比例稀釋標(biāo)準(zhǔn)品至10μg/ml。取干凈離心管或試管，按下表進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品濃度的依次稀釋，獲得不同濃度的多個(gè)磷標(biāo)準(zhǔn)。

2.        制備待測樣液：取用粗AMP水解液或RNA水解液，作為待測樣液。

3.        磷測定：按下表進(jìn)行操作，依次加入下列溶液，不能顛倒，每加一種試劑，必須充分混勻。如果樣品中有無機(jī)磷，應(yīng)同時(shí)檢測無機(jī)磷，并將無機(jī)磷扣除。

4.        孵育，以空白管調(diào)零，比色杯光徑1.0cm，分光光度計(jì)測定660nm處吸光度(即為A₆₆₀)，分別為A_氧化、A_未氧化。

計(jì)算:

 以磷含量（μg/ml）為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)作圖，得標(biāo)準(zhǔn)曲線。氧化管為樣液中所有磷的含量，未氧化管為樣液未氧化前無機(jī)磷的含量，二者只差即為樣液中5′-核苷酸磷含量。

按下列公式計(jì)算樣液中5′-核苷酸的含量：

5′-

核苷酸含量（mg/ml）=（CM/31）×（N/1000）

注意事項(xiàng)：

1.        上述低溫試劑避免反復(fù)凍融，以免失效或效率下降。

2.        待測樣本如不能及時(shí)測定，應(yīng)置于2~8℃保存，3天內(nèi)穩(wěn)定。

3.        如果樣品濃度過高，應(yīng)用蒸餾水稀釋后重測，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

有效期：6個(gè)月有效。