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BA1047-50-半胱氨酸(Cys)含量檢測試劑盒
  • BA1047-50-半胱氨酸(Cys)含量檢測試劑盒
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貨物所在地:上海上海市

地: 上海

更新時間:2024-12-19 11:40:33

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半胱氨酸(Cys)含量檢測試劑盒
蛋白質(zhì)含有三種含硫氨基酸:甲硫氨酸、胱氨酸和半胱氨酸(Cys)。其中,Cys是wei一一種含有巰基的含硫氨基酸,從甲硫氨酸轉(zhuǎn)化而來,并且可與胱氨酸互相轉(zhuǎn)化。Cys參與蛋白質(zhì)二硫鍵的形成,經(jīng)常是蛋白質(zhì)活性中心的組成部分,還可以為其它生理生化反應(yīng)提供巰基。

半胱氨酸(Cys)含量檢測試劑盒(可見分光光度法)

產(chǎn)品貨號:BA1047

產(chǎn)品規(guī)格:50/48

產(chǎn)品內(nèi)容:

提取液:液體25mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體45mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。用前1天,向試劑二中加5mL蒸餾水充分溶解,再加磷酸1.25mL混勻后蓋緊(防止水分散失)沸水浴2h;冷卻后加20mL 蒸餾水,4℃可保存2周。

標準品:粉劑×1支,10mg半胱氨酸,4℃保存。

產(chǎn)品說明:

蛋白質(zhì)含有三種含硫氨基酸:甲硫氨酸、胱氨酸和半胱氨酸(Cys)。其中,Cys是wei一一種含有巰基的含硫氨基酸,從甲硫氨酸轉(zhuǎn)化而來,并且可與胱氨酸互相轉(zhuǎn)化。Cys參與蛋白質(zhì)二硫鍵的形成,經(jīng)常是蛋白質(zhì)活性中心的組成部分,還可以為其它生理生化反應(yīng)提供巰基。此外,Cys大量積聚在皮膚和粘膜表面,在角蛋白生成中維持重要的巰基酶的活性,并且補充巰基,以維持皮膚的正常代謝,調(diào)節(jié)表皮最下層的色素細胞生成的底層黑色素。具有美白、解毒、改善炎癥和過敏性皮膚等作用。

Cys還原磷鎢酸生成鎢藍,在600nm處有吸收峰;通過600nm吸光度,計算Cys含量。

需自備的儀器和用品:

低溫離心機、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、磷酸和蒸餾水。

操作步驟:

一、半胱氨酸提取:

1、液體樣品中半胱氨酸提?。喝?span>0.2mL液體樣品,加提取液0.3mL,充分混勻,11000rpm4℃離心10min,取上清液,待測。

2、組織中半胱氨酸提?。悍Q取約0.2g組織,加入提取液0.5mL,冰上充分研磨,11000rpm4℃離心10min,取上清液待測。

二、測定操作:

1. 可見分光光度計/酶標儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長到600nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 標準液的配制:將標準品加入0.826mL蒸餾水,可得到100µmol/mL的標準液,稀釋為40、2010、8、2、10.5、0.25 µmol/mL濃度的標準溶液。

3. 按下表加入各試劑

試劑名稱(μL

測定管

標準管


樣本

200



標準液


200


蒸餾水



200

試劑一

500

500

500

試劑二

300

300

300

混勻后室溫靜置15min,于600nm處測定吸光值。

三、樣品中半胱氨酸含量計算:

1、標準曲線的繪制:

以各標準溶液濃度為x軸,以?AA標準管-A空白管)為y軸做標準曲線,得到方程y=kx+b 將(A測定管-A對照管)帶入方程求x值。

2、半胱氨酸含量計算:

1)按液體樣本的體積計算

半胱氨酸含量(µ mol/mL=x×V樣總÷V=2.5x

2)按鮮重計算:

半胱氨酸含量(µ mol/g鮮重)= x×V樣總÷W=0.5x÷W

V:液體樣本體積,0.2 mL;V樣總:提取體系體積,0.5mLW:樣品質(zhì)量,g



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