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白蛋白檢測試劑盒(溴甲酚綠微板法)
產品貨號: BA1553
產品規格:100T
產品簡介:
總蛋白(Total Protein,TP)由白蛋白和球蛋白組成,檢測白蛋白的方法有雙縮脲法、色氨酸法、染料結合法。檢測白蛋白的染料結合法可采用溴甲酚綠或溴甲酚紫染料結合,上述染料對白蛋白具有高度的親和力,通常監測染料與白蛋白結合的初速率,該速率與樣品中白蛋白濃度成正比。
尚寶生物 白蛋白檢測試劑盒(溴甲酚綠微板法)檢測原理是在酸性環境下,白蛋白分子帶正電荷,不帶負電荷的溴甲酚綠 (Bromocresol green,BCG)結合生成藍綠色復合物,在628nm處有吸收波,該復合物的吸光度與白蛋白濃度成正比,不同樣處理的白蛋白標準比較,求得待測樣品中白蛋白濃度。本試劑盒多用于人或動物血清、血漿、組織等樣本中的蛋白含量測定,該法操作簡單、方法特異,既可手工操作,又可采用自動分析儀檢測。本試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產品組成:
產品名稱 | 規格 | 保存條件 |
試劑(A):BCG試劑 | 25ml | 4℃,避光 |
試劑(B):白蛋白標準 | 20mg | 室溫 |
試劑(C):白蛋白標準配制液 | 2ml | 室溫 |
試劑(D):BCG空白試劑(備選) | 10ml | 4℃,避光 |
自備材料:
1. 離心管、小試管
2. 96孔板
3. 酶標儀
1. 取0.5ml白蛋白標準配制液或稀釋液加入到白蛋白標準中,充分溶解后配制成40mg/ml的白蛋白標準溶液,配制后可立即使用,溶解后的白蛋白標準溶液應-20℃保存。特別提示:待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,白蛋白標準也宜溶解于什么樣的稀釋液中。例如待測蛋白溶解于蔗糖中,亦取白蛋白標準溶解于蔗糖中。一般也可以用0.9%NaCl或PBS作為溶解白蛋白標準品的稀釋液。
2. 樣本處理:血清、血漿樣本直接取5μl檢測。對于組織樣本,按組織質量(g):生理鹽水=1:9比例,加入9倍體積的生理鹽水或PBS,冰浴下勻漿后,2500g離心10min,取5μl上清待檢。
3. 白蛋白加樣操作,按下表依次加入試劑:
加入物(μL) | 空白管 | 標準管 | 待測管 |
白蛋白標準配制液 | 5 | - | - |
白蛋白標準溶液(40mg/ml) | - | 5 | - |
待檢樣品(血清、血漿、組織勻漿液) | - | - | 5 |
BCG試劑 | 250 | 250 | 250 |
4. 先在酶標儀628nm處以空白管調零,逐管加入BCG試劑,并立即混勻。
5. 放置(30±3)s,讀取標準管和各待測管的吸光度。
6. (備選步驟)當遇到脂血混濁,可設“樣本空白孔":取5μl待測樣品加入250μlBCG空白試劑,以BCG空白試劑調零,讀取樣本空白孔吸光度。用待測孔吸光度減去樣本空白孔吸光度后的凈吸光度,計算白蛋白濃度。
計算:
白蛋白(g/L)=(待測孔吸光度/標準孔吸光度)×白蛋白標準液濃度(g/L)
參考區間 :
4~14 兒童 38~54g/L
健康成年人 34~48g/L
注意事項:
1. 白蛋白標準粉末溶解于白蛋白標準配制液后,即獲得白蛋白標準原液,該原液中含有防腐劑,不影響后續檢測,該蛋白標準原液-20℃長期保存。
2. 如果沒有酶標儀,也可以使用分光光度計測定。使用分光光度計測定蛋白濃度時,每個試劑盒可以測定的樣品數量可能會顯著減少。
3. 本法線性范圍是10~60g/L。
4. 該法測定正常樣本的批間變異系數為6.3%。
有效期:12個月有效。白蛋白標準配制成溶液后應-20℃凍存。
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