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茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵比色法)
產品貨號: BA1569
產品規格: 50T
產品簡介:
茶多酚(Tea?Polyphenols,TP)是茶葉中多酚類物質的總稱,包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等,是一類兒茶素為主體的黃酮化合物,兒茶素占60~80%,具有C6-C3-C6碳骨架結構,是一種重要的天然抗氧化物質,能夠清除自由基。類物質茶多酚又稱茶鞣或茶單寧。
茶多酚(TP)檢測試劑盒(酒石酸鐵比色法)檢測原理是以酒石酸鐵為底物,利用茶多酚與酒石酸鐵反應,生成穩定化合物,以分光光度計540nm處測定吸光度,在一定范圍內吸光度與顏色深淺的變化成正比,與標準曲線比較,進而計算茶多酚含量。該試劑盒主要用于測定植物組織、血清等樣品中茶多酚含量,尤其適用于測定茶葉中茶多酚含量。該試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產品組成:
產品名稱 | 50T | 保存條件 |
試劑(A): 茶多酚標準(1mg/ml) | 1ml | 4℃,避光 |
試劑(B): TP Assay bufffer | 500ml | 4℃ |
試劑(C):TP顯色液 | 25ml | 4℃,避光 |
自備材料:
1. 蒸餾水
2. 研缽
3. 離心管或試管
4. 離心機
5. 比色杯
操作步驟(僅供參考):
1. 配制茶多酚標準:取干凈離心管或試管和茶多酚標準(1mg/ml),按下表進行操作,依次稀釋。
加入物(ml) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
茶多酚標準(1mg/ml) | 0.01 | 0.02 | 0.03 | 0.04 | 0.05 |
TP Assay buffer | 0.49 | 0.48 | 0.47 | 0.46 | 0.45 |
相對于茶多酚含量(μg/ml) | 20 | 40 | 60 | 80 | 100 |
2. 準備樣品:?
①植物樣品:取植物組織,研磨成粉末。煮沸?TP?Assay?buffer,將0.2g粉末*加入TP?Assay?buffer中,沸水浴,用200目細胞篩或濾紙過濾。濾渣再繼續置于新的煮沸4.5ml?TP?Assay?buffer中,沸水浴,用200目細胞篩或濾紙過濾,合并兩次濾液。5000g離心,取上清液,即為茶多酚提取液。4℃避光保存,用于茶多酚的檢測。?
②血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規方法制備后可以直接用于本試劑盒的測定,4℃避光保存,用于茶多酚的檢測。?
③細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織裂解液,如有必要用TP?Assay?buffer進行適當勻漿,5000g離心15min,取上清液,即為茶多酚提取液。4℃避光保存,用于茶多酚的檢測。
④高濃度樣品:如果樣品中含有較濃度的茶多酚,可以使用TP?Assay?buffer進行恰當的稀釋。?
3. TP加樣:按照下表設置空白管、對照管、測定管,溶液應按照順序依次加入,并注意避免產生氣泡。如果樣品中的TP濃度過高,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定。樣品的檢測最好能設置2平行管,求平均值。
加入物(ml) | 空白管 | 標準管 | 測定管 |
TP Assay buffer | 2 | 1.5 | 1.5 |
茶多酚標準(1-5號) | - | 0.5 | - |
待測樣品 | - | - | 0.5 |
TP顯色液 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
4. TP測定:比色杯光徑1.0cm,以空白調零,以分光光度計測定540nm處標準管、測定管的吸光度。
計算:
以系列茶多酚標準濃度(1-5號)(20、40、60、80、100μg/ml)為橫坐標,以對應的吸光度為縱坐標,繪制標準曲線,求得回歸方程。以測定管吸光度代入回歸方程求得提取液中TP含量。
組織樣本TP含量(μg/g)=(C×VT)/(W×VS)
液體樣本TP含量(μg/ml)=(C×VT)/VS
VS=測定時所用提取液的體積(ml)
注意事項:
1. 提取茶多酚時,注意提前煮沸TP?Assay?buffer,以便充分提取。?
2. 如果沒有分光光度計,也可以使用普通的酶標儀測定。?
3. 每次檢測指標不宜過多,否則操作時間不一,有可能導致樣本間的差異。
有效期:6個月有效。
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