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甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒(可見分光光度法)
注意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定。
產品貨號:BA1109
產品規格:50管/48樣
測定意義:
TG是長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不僅是細胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。血清TG是一項重要的臨床血脂常規測定指標。
測定原理:
用異丙醇抽提取血清TG,KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸,過碘酸氧化甘油生成甲醛,在氯離子存在下甲醛與乙酰丙酮縮合生成黃色物質,在420nm有特征吸收峰,其顏色的深淺與TG含量成正比。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋、可調節移液器、1mL玻璃比色皿、雙蒸水。
產品組成:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體×1瓶,4℃避光保存。
試劑五:液體×1瓶,4℃避光保存。
試劑六:液體×1瓶,4℃避光保存。
標準品:液體×1支,1mg/mL標準甘油三酯溶液,4℃保存。
操作步驟:
1. 分光光度計預熱30min以上,調節波長到420nm,蒸餾水調零。
2. 水浴鍋預熱到65℃。
3. 甘油三酯的提?。?/span>
加試劑一后充分混勻,再加試劑二,劇烈振蕩30s,靜置,待分層后取上層溶液0.15mL,置于新的EP管中。
4. 甘油三酯含量測定:
空白管 | 標準管 | 測定管 | |
上層溶液(μL) | 150 | 150 | 150 |
試劑三(μL) | 500 | 500 | 500 |
試劑四(μL) | 150 | 150 | 150 |
充分混勻,65℃水浴3min | |||
試劑五(μL) | 500 | 500 | 500 |
試劑六(μL) | 500 | 500 | 500 |
充分混勻,65℃水浴15min |
取出EP管,待冷卻后,于420nm處比色,記為A空,A標和A測。
甘油三酯含量計算:
血清甘油三酯含量(mg/dL)=C標準品×(A測-A空)÷(A標-A空)×100mL
=100×(A測-A空)÷(A標-A空)
C標準品:1mg/mL;100mL:血清體積,1dL=100mL。
注意事項:
1. 試劑盒中有易揮發性物質,實驗過程中需佩戴手套和口罩,試劑瓶蓋打開后應該及時蓋緊。
2. 加試劑二后需劇烈震蕩,使血清中甘油三酯得到充分提取。
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