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為什么細胞會抱團?因為天氣冷了?

時間:2021/12/9閱讀:3746
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是否總是遇到細胞抱團的現象?是否總是因為搞不清楚細胞抱團原因而困惑?是否總是因為難以將抱團細胞拯救回來而抓狂?童鞋們,我來拯救你們的細胞了,今天給大家從四個層面剖析細胞抱團的真實原因,快來圍觀吧!


一、細胞本身生長特性有抱團傾向

有些細胞本身有抱團生長的特性,給大家看五種喜歡抱團的細胞類型:


細胞類型①:NCI-H716 人結直腸腺癌細胞

形態:淋巴母細胞樣

生長特性:懸浮生長


圖片
細胞喜歡在懸浮液中呈葡萄狀聚集,抱團細胞粒粒飽滿


細胞類型②:Caco-2人結直腸腺癌細胞

形態:上皮樣

生長特性:貼壁生長


圖片
此細胞喜歡貼壁成片分布,呈融合狀,細胞個頭大小不勻


細胞類型③:CaLu-3 人肺癌細胞

形態:上皮樣

生長特性:貼壁生長


圖片
此細胞也是喜歡聚集分布,呈片狀,片狀之間有空白



細胞類型④:SH-SY5Y人神經母細胞瘤細胞

形態:上皮樣

生長特性:貼壁和懸浮生長


圖片
此細胞貼壁居多,有輕微的抱團傾向



細胞類型⑤:BT-474人乳腺癌細胞

形態:上皮樣

生長特性:貼壁、片狀生長


圖片
此細胞也是喜歡片狀生長



除了有喜歡抱團的細胞類型,也會有喜歡分散生長的細胞類型,來給大家展示二種細胞類型:

細胞類型①:MSC(人源脂肪來源)

形態:成纖維樣

生長特性:貼壁生長


圖片
此細胞成纖維樣,均勻分布,平鋪皿底,不留空隙



細胞類型②:HEF小兒包皮成纖維細胞(人源脂肪來源)

形態:成纖維樣

生長特性:貼壁生長


圖片
此細胞也是喜歡分散生長,均勻分布



大多數上皮樣或神經母細胞瘤樣的細胞更喜歡抱團生長,而大多數成纖維樣細胞更喜歡分散、均勻生長。


又有一個問題來了,那就是我們如何區分細胞抱團正不正常。

這里開始劃重點了,大家看好了:

  1. 如果細胞本身是分散生長,結果抱團嚴重,說明細胞“生病"了,我們要給細胞“診治"。

  2. 如果本身生長特性就有抱團的細胞,如何判斷它的抱團正不正常呢?


這里小編告訴您,細胞哪怕是抱團了,也是“粒粒飽滿,棱角分明"的,回頭看看上面抱團的細胞,是不是細胞之間有明確的“分界線",這說明它們抱在一起很健康;而異常的細胞抱團,你是觀察不到細胞之間的“界限"的,細胞形態也不規則,邊緣模糊,遠遠看去,抱團的細胞像“一團漿糊"。



二、細胞老化更容易抱團 


細胞類型:MSC(人源臍帶來源第6代)

形態:成纖維樣

生長特性:貼壁生長

圖片
如圖所示:

人臍帶來源第6代的間充質干細胞,白色箭頭指示的是發生細胞老化的MSC細胞,β-半乳糖苷酶染色陽性,染上藍色。由圖片可以看出老化細胞體積增大、細胞扁平。白圈圈起來的是聚團細胞,老化細胞容易聚團生長,狀態變差。


三、血清批間差可能導致細胞抱團 

那么問題來了,血清為何有批間差?

因為血清來源于動物,其組成成分有1000種左右,且血清組成及含量常隨供血動物的年齡、生理條件和營養條件而異。每個批號的組分百分比含量都是不固定的,所以批間差異是存在的。

圖片

H9c2 低密度正常形態

舊批次血清


圖片

H9c2 低密度抱團形態

新批次血清


圖片

H9c2高密度異常形態

舊批次血清


圖片

H9c2高密度異常形態

新批次血清


血清批間差可能會導致細胞抱團。

如圖所示,大鼠心肌細胞在更換了新批次的血清之后,隨著傳代次數的增加,抱團明顯。正常低密度下,細胞舒展開來,均勻分散,但異常的的細胞會呈現聚集生長狀態,高密度下正常細胞像鋪路石一樣均勻鋪滿,不留空隙,但高密度下異常的細胞,形態模糊,難以辨認,像四川九寨溝一樣的溝壑重生。


四、胰酶消化不當容易導致細胞抱團 

圖片

HEK293細胞


導致細胞抱團的第一種情況是胰酶消化操作不當。

如果您經常遇到傳代的細胞貼壁后老是貼壁不勻,成片分布,抱團生長,來看看你有沒有注意這幾個細節噢。

1、如圖所示,HEK 293因消化過度或吹打過猛導致細胞受傷嚴重,破損的細胞碎片容易粘連抱團;

2、消化時細胞融合率太高,成片脫落,將不容易被吹散,容易抱團,我們建議細胞融合率達到80%傳代為佳;

3、吹打力度不足,難以將成片脫落的細胞吹散,容易抱團。



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