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深圳市安培生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第5年

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電解質(zhì)梯度測(cè)序膠 簡介

時(shí)間:2021/12/15閱讀:997
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原理

通過簡單地提高下槽緩沖液的鹽濃度,使凝膠底部的離子強(qiáng)度得以提高,在電泳過程中,鹽離子可以電泳進(jìn)入凝膠并產(chǎn)生重復(fù)性好的及有效的梯度。

材料與儀器

DNA
TBE 乙酸鈉
電泳儀

步驟

 

1.  按基本方案步驟1~22灌制凝膠及進(jìn)行預(yù)電泳,但上槽緩沖液為0.5×TBE,下槽為1×TBE。

2.  按基本方案步驟23~26步準(zhǔn)備樣品及加樣。
 
3.  如需測(cè)≤400堿基的序列信息,加入3 mol/l 乙酸鈉于下槽緩沖液至終濃度1 mol/l, 執(zhí)行步驟5。
 
4.  如果需測(cè)大于400堿基的序列信息,先按步驟5進(jìn)行,電泳2~3 h,然后加入3 mol/l 乙酸鈉于下槽至終濃度為1 mol/l。 

5.  在60 W 恒功率下電泳。

6.  進(jìn)行基本方案步驟23~33。
 

 

同實(shí)驗(yàn)其他方法

變性凝膠電泳實(shí)驗(yàn)

1.  制作每塊凝膠時(shí),首先要用肥皂及水小心嚴(yán)格地清洗兩塊30 cm×40 cm的前后玻璃平板,用去離子水沖洗后晾干,用噴射洗瓶噴10%乙酵或異丙醇使平板濕海。 2.  然后用Kimwi

含甲酰胺的測(cè)序膠

1.  按基本方案步驟1~5組裝凝膠平板夾層。   2.  按所需濃度配制甲酰胺凝膠溶液,加熱輕輕挽拌使之溶解,冷卻至30℃以下。 3.  加入0.15 ml TEMED

緩沖液梯度測(cè)序膠

1.  按基本方案步驟1~5組裝凝膠平板夾層。   2.  在2個(gè)100 ml 燒杯中,配制緩沖液梯度凝膠溶液:50 ml 用0.5×TBE配制,25 ml 用2.5×TBE配制

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安培生物科技有限公司介紹:

安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對(duì)細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。

 

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