精品亚洲a∨无码专区毛片-精品亚洲aⅴ无码午夜在线-精品亚洲aⅴ无码午夜在线观看-精品亚洲aⅴ无码一区二区三区-精品亚洲aⅴ无码专区毛片-精品亚洲aⅴ在线

深圳市安培生物科技有限公司
中級會員 | 第5年

19126518388

血清系列
細胞轉染
支原體清除
細胞凍存
實驗耗材
分子試劑
細胞增殖與凋亡
Biozellen系列
培養基
ELISA試劑盒
TOYOBO(東洋紡)
ZYMO RESEARCH
Greiner(格瑞納)
IKA(艾卡)
化學發光底物(ECL)
PROSPEC系列
Epigentek系列
微生物檢測
細胞生物學
Corning康寧
解離試劑
細胞類-實驗耗材
原代細胞
植物檢測系列試劑盒
SERANA
BSA
細胞系
生化試劑盒
環境檢測系列試劑盒(AKEN)
類器官培養
緩沖器和解決方案
生物三凝膠基質
細胞因子分子
生物樣本庫

IPS細胞怎么誘導分化?

時間:2022/1/4閱讀:2997
分享:

IPSC生成通常是實現真正的實驗目標的中間步驟。

它一般應用于:

人胚胎發育建模;

作為難以分離的細胞來源,用于基礎研究和疾病建模;

藥物篩選應用;

細胞替代治療。


IPS神經分化的protocol,以下是神經細胞的分化操作步驟,可供參考:

準備好神經誘導分化的培養基,建議使用Essential 8TM培養基以Matrigel基質膠作為基質,或者使用StemPro hESC SFM培養基以Geltrex作為基質。


1、高品質的PSCs(無分化或者僅含少量分化的克隆)是進行有效的神經誘導的關鍵。在傳代PSCs時去除所有的或者大部分分化的克隆。分化的克隆可以通過使用Nikon顯微標志和Nikon顯微C-OA 15mm目標適配器被標記


2、當PSCs達到~70-80%融合時,根據PSC分種實驗方法將PSC接種到6孔板中在分種PSC團塊前,確定分種的密度,方法如下:


3、當準備好PSC細胞懸液后,取部分細胞到15-ml錐形管中來估算PSC細胞懸液的總細胞量(如,將6孔板的一個孔中的細胞制備成6ml PSC細胞懸液,鄧1ml來進行細胞數估算)。


4、將裝有細胞的15-ml錐形管以200×g離心3分鐘,棄上清。


5、加入1ml預熱的StemPro Accutase細胞消化液,37度孵育5分鐘。


6、用1ml的移液管上下猛烈的吹吸5次,將細胞分散成單個細胞懸液。


7、選擇你常用的方法計數總細胞數。如果在1ml Accutase細胞消化液中的總細胞數為1×10^6,那么剩下的5ml PSC細胞懸液中的總細胞數為1×10^6×5=5×10^6


8、加入2.5ml PSC培養基至包被好的6孔板的每個孔中。


9、溫和的混勻有PSC細胞懸液的錐形管,將PSCs以2.5×10^6-3×10^5的數量接種到每個孔中。例如,如果PSC懸液為1×10^6個細胞/ml,將0.25-0.3ml PSC懸液加入到每個孔中。


10、快速的前后左右晃動培養皿,將細胞分散到整個表面,于CO2培養箱中培養。


以下點需要注意:

1、分種 的比例根據在分種前PSCs的融合程度用PSC細胞系類型的不同而有所差異。在分種后的第一天即開始進行神經誘導(大約傳代后24小時)。在傳代PSCs時,PSCs的起始密度應該在15-25%的融合細胞需要以團塊狀接種,避免成為單個細胞。單個細胞接種PSC易增加細胞的死亡。

2、在分種的時候可以將10um ROCK抑制劑加入到PSC培養基中處理過夜,以防止細胞的死亡。

3、如果起始用的PCS狀態很差,非神經樣的克隆將會在培養中出現。在這種情況下,可以有兩種操作選擇:

a、如果僅在培養皿的極少區域出現該細胞形態,在挑除非神經樣分化的克隆后可以繼續培養。為了去除非神經樣分化的克隆,先用顯微標記出所有非神經樣分化的克隆。傾斜培養皿,用巴氏玻璃吸管將標記的克隆吸掉去除。將培養皿旋轉180度,重復以上步驟。操作每個孔時均重復以上步驟,以避免細胞缺少培養基而需經受無培養基壓力。

b、如果出現了大量的非神經樣的克隆,建議放棄繼續培養,而選擇高品質的PSCs重頭開始。

c、更換培養基一定要注意,請預熱*培養基,冰冷的培養基加入會導致細胞皺縮和漂浮。



以上就是本期的內容,更多資訊,歡迎點擊安培生物網站鏈接了解更多技術與產品資訊


安培生物科技有限公司介紹:

安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉染、大規模生物生產、基因和細胞治療領域客戶,提供*細胞體內可代謝的核酸轉染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動物血清產品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產,包括培養間充質干細胞和多種免疫細胞系等,為制藥公司或者生物技術公司提供無血清細胞培養規模生產服務;提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養可分解3D基質膠產品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產品。安培生物專注為生物醫藥領域提供優質的產品和技術服務,努力發展為基因治療、細胞治療的生物科技企業。



會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
撥打電話
在線留言
主站蜘蛛池模板: 亚洲国产成人精品无码区密臀Av| 精品无人乱码一区二区三区| 麻豆MD传媒MD0049入口| 亚洲国产中文美国国产综合一区二区 | 欧美又粗又嫩又黄A片成人| 麻豆自制传媒最新网站| 91一区二区三区四区五区| 色网站在线播放| 抠逼喷水| 国产成人精品综合在线| 亚洲午夜精品久久久久久抢| 国产精品久久久久久久久99热| 中文字幕无码免费久久99| 亚洲欧美日韩中文无线码| 91精产国品一二三a区| 欧美成人精品视频在线播放| 色尼玛亚洲综合| 国产精品亚洲一区在线播放| 亚洲精品深夜AV无码一区二区| 亚洲国产韩国一区二区| 久久精品国内免费视频| 国产又色又爽又黄视频网站| 乱码视频午夜在线观看| 亚瑟国产精品久久无码| 2020国产成人综合网| 欧洲一级| 免费国产美女爽到喷出水来视频| 在线免费观看国产视频| 国产女人喷潮视频在线观看| 综合久久影院| 97自拍| 麻豆久久婷婷国产综合五月| 久久AV国产麻豆HD真实乱| 美女被C污黄网站免费观看| 亚洲 欧美 综合 另类 中字 | 一级片网站在线观看| 51久久久中文精品不卡影院| 久久女同一区二区免费av| 国产孰妇精品AV片国产m3u8| 在线观看在线免费视频神马午夜福利| 在线毛片一区二区|