精品亚洲a∨无码专区毛片-精品亚洲aⅴ无码午夜在线-精品亚洲aⅴ无码午夜在线观看-精品亚洲aⅴ无码一区二区三区-精品亚洲aⅴ无码专区毛片-精品亚洲aⅴ在线

深圳市安培生物科技有限公司
中級會員 | 第5年

19126518388

血清系列
細胞轉染
支原體清除
細胞凍存
實驗耗材
分子試劑
細胞增殖與凋亡
Biozellen系列
培養基
ELISA試劑盒
TOYOBO(東洋紡)
ZYMO RESEARCH
Greiner(格瑞納)
IKA(艾卡)
化學發光底物(ECL)
PROSPEC系列
Epigentek系列
微生物檢測
細胞生物學
Corning康寧
解離試劑
細胞類-實驗耗材
原代細胞
植物檢測系列試劑盒
SERANA
BSA
細胞系
生化試劑盒
環境檢測系列試劑盒(AKEN)
類器官培養
緩沖器和解決方案
生物三凝膠基質
細胞因子分子
生物樣本庫

細胞周期檢測(流式細胞術)

時間:2022/10/18閱讀:2386
分享:

原理


流式細胞周期檢測是一種常見的檢測細胞增殖情況的方法之一,細胞在不同周期時,其內的DNA含量不同。碘化丙啶(PI)作為一種核酸嵌入型染料,能夠進入固定后的細胞中,與細胞內的核酸結合,其熒光強度與DNA含量成正比。通過流式細胞儀檢測不同細胞中的熒光強度,從而判定不同組別中細胞周期發生的變化。


用途


檢測不同組別或處理對某種細胞周期的改變。


材料與儀器


【器材】
流式細胞儀、移液器、槍頭、離心管、離心機、流式細胞儀、水浴鍋、流式管、濾頭;
【試劑】0.25% 胰蛋白酶溶液、PBS、RNA酶、PI染液、70% 乙醇溶液(建議提前放入負二十預冷);


步驟


1.以腫瘤細胞為例,將正常生長的對照或處理組腫瘤細胞計數,每組取2×105-3×105個細胞鋪板,待細胞貼壁后,將正常培養基替換為無血清1640培養基,同步化20 h,使得所有細胞都進入相同的細胞周期時期;同步完后,將培養基重新替換為正常含血清培養基,繼續培養24 h;
 
2.用不含EDTA的胰酶將細胞消化,收集細胞,300 g,離心3 min;用吸引器去除培養基,用PBS清洗細胞一次,再次300 g,離心3 min;去除PBS,用提前預冷的70%酒精重懸細胞沉淀,4℃固定過夜;
 
3.4℃,1000 g,離心3-5 min,去除酒精,用PBS清洗3遍,最后一遍去除PBS;加入300 μL PBS,輕輕吹打,重懸細胞沉淀,加入相應量的Rnase至終濃度100 μg/mL,37 ℃水浴鍋中消化30 min;
 
4.上機前加入PI(5 mg/mL)至終濃度50 μg/mL,避光孵育15 min;孵育完后,過300目細胞篩,上機檢測;
 
5.分析數據。
  


注意事項


1. PI為致癌物質,避免用手直接接觸。

2. 細胞數目應該達到2x104個,細胞數目過少影響實驗結果的準確性。
 
3.鋪板的細胞數量以收獲細胞時有足夠的生長空間來動態調節,現在的流式細胞儀靈敏度很高,不需要太多的細胞。
 
4. 在制備時,要清洗干凈酒精,特別注意清洗過程中細胞的損失。離心次數不宜過多,防止細胞丟失。
 
5. 可以用未處理的細胞調試流式細胞儀。
 
6.胰酶不加EDTA

 


常見問題


Q:酒精固定后細胞難以沉淀下來,導致細胞丟失較多;

A:可適當延長離心時間和轉速。


以上就是本期的內容,更多資訊,歡迎點擊安培生物網站鏈接了解更多技術與產品資訊

 

安培生物科技有限公司介紹:

安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉染、大規模生物生產、基因和細胞治療領域客戶,提供*細胞體內可代謝的核酸轉染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動物血清產品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產,包括培養間充質干細胞和多種免疫細胞系等,為制藥公司或者生物技術公司提供無血清細胞培養規模生產服務;提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養可分解3D基質膠產品;提供內毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產品。安培生物專注為生物醫藥領域提供優質的產品和技術服務,努力發展為基因治療、細胞治療的生物科技企業


會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
撥打電話
在線留言
主站蜘蛛池模板: 玖玖精品视频| 亚洲精品久久久WWW游戏好玩| 18成人片黄网站WWW| 久久久久久国产精品免费 | 久久精品亚洲一区二区三区浴池 | 亚洲中文字幕无码一久久区| 无码超级大爆乳在线播放| 精品无人区无码乱码大片国产| 揄拍自拍| 久久久青草青青国产亚洲免观| 久久99精品久久久久久首页| 日本在线不卡高清免费| 麻豆视频免费播放| 精品日韩视频| 在线精品视频一区二区三区| 无码人妻精品一区二区三区99仓本 | 精品欧美一区二区3d动漫| 中文无码第3页不卡av| 少妇av天堂影音先锋| 精品成在人线av无码免费看| 亚洲综合国产成人丁香五月激情| 一个人看的www片免费高清| 久久无码潮喷A片无码高潮动漫| 亚洲AV片不看国产九九| 99久久人妻精品免费二区| 久久无码人妻国产一区二区| 亚洲一区二区欧美| 91精品国产兔费观看久久| 久久久国产一区二区三区丝袜 | 亚洲中文字幕在线观看| 中文字幕无码家庭乱欲| 国产在线观看91精品2024| 亚洲国产日本韩国欧美mv| 韩国三级日本三级香港黄| 国产精自产拍久久久久久蜜| 丝袜日韩制服另类在线| 无码在线专区| 国产av一区二区三区无码野战| 欧洲无线一线二线三线区别大吗| 精品一区二区三区AV天堂| xxxxwwww在现免费观看|