當前位置:深圳市安培生物科技有限公司>>技術文章>>實驗新手如何養好細胞?
常聽到一些新手同學養細胞,自己總是經歷失望-絕望-希望的過程,現在為了方便一些新手同學養好細胞。把幾點注意問題跟大家分享一下,希望能夠對新手們稍有幫助:
1. 細胞不要過度消化,有些貼壁不牢的如293T,加入胰酶在臺子里晃晃就可以了,不用放到溫箱中;
2. 傳代時,細胞分的稀了或者分的不均勻,形成單細胞的克隆群,細胞就會長成密密麻麻的一群,如293T會成為小方塊狀,而不是正常的不規則形狀,這時候,即使沒有長滿盤,也應該消化重新鋪板。
3. 貼壁細胞的上清看起來清亮、顏色正常時,即使在鏡下檢測有些懸浮物,一般不是污染而是死細胞,尤其是復蘇的細胞,由于有死細胞,會有很多懸浮物。(以前很多同學看到有懸浮物就以為污染了,還倒掉了好不容易借來復蘇的一盤細胞)。污染了會看到明顯的懸濁液。
4. 不能讓培養基變色,稍微變黃就應該傳代,如果沒有長滿,可以換液,但是如果變黃了,細胞就會皺縮,或者死亡,大批量的浮起來。這時候就別挽救了。
5. 關于污染,很多新手剛開始做的時候,無論怎么小心,還是會莫名其妙的污染。這個咱們說是人生必經階段。到現在我也還是很贊同這個理論。所以,絕望后別放棄才會有希望!
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