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收到活細(xì)胞怎么處理?

時(shí)間:2023/1/4閱讀:1419
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 收到細(xì)胞后,發(fā)現(xiàn)是培養(yǎng)瓶,第一次操作的束手無策,怎么辦?

 

首先我們得弄明白我們得細(xì)胞是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞或者是半懸浮細(xì)胞,不明白的同學(xué)可以參考下圖哦:




 

貼壁細(xì)胞:SKOV3

 

 

 

 

懸浮細(xì)胞:THP-1

半懸浮半貼壁:BV-2細(xì)胞

 

貼壁細(xì)胞請(qǐng)遵守以下準(zhǔn)則:

細(xì)胞收到后,顯微鏡下觀察,有些細(xì)胞貼壁比較牢,它不會(huì)因?yàn)檫\(yùn)輸問題有變化,收到后下顯微鏡下觀察細(xì)胞的密度,確定無污染,細(xì)胞無異常先放培養(yǎng)箱穩(wěn)定1-2個(gè)小時(shí)后,按照貼壁細(xì)胞消化順序消化:
一. 貼壁細(xì)胞消化順序如下:

1.準(zhǔn)備工作,胰酶預(yù)熱,培養(yǎng)基預(yù)熱,PBS預(yù)熱10-15分鐘
1. 去上清,先用PBS清洗兩次

2.棄PBS后,加入1ml胰酶,前后左右輕輕搖勻后,超凈臺(tái)常溫放置3-5分鐘左右

3.顯微鏡下觀察細(xì)胞,若細(xì)胞變得橢圓透亮后,輕拍細(xì)胞瓶壁;

4.顯微鏡下觀察細(xì)胞是否已經(jīng)脫落,要是沒有脫落繼續(xù)消化2分鐘后再輕輕拍打,95%以上細(xì)胞脫落請(qǐng)立即加入含有血清的培養(yǎng)基終止消化。

5.將消化下來的細(xì)胞懸液移入離心管離心,正常離心轉(zhuǎn)速:1000-1200轉(zhuǎn),5分鐘

6.分瓶,第一次傳代建議1:2傳,或者傳代一瓶,凍存一支。

 

 

二.懸浮細(xì)胞傳代規(guī)則:
1,收到細(xì)胞后穩(wěn)定一小時(shí)后,分兩個(gè)50ml的離心管對(duì)等離心1000轉(zhuǎn)5分鐘;

2.  棄上清,一管分2個(gè)T25瓶傳代,一管凍存

懸浮細(xì)胞傳代不需要每次都離心操作,建議每傳代2次離心操作一次,以去除細(xì)胞中的碎片

 

 

 

三.半懸浮半貼壁細(xì)胞消化要領(lǐng):1.收到細(xì)胞穩(wěn)定一小時(shí)后,懸浮細(xì)胞收集離心,貼壁細(xì)胞按照貼壁順序來消化即可

 

 

收到細(xì)胞請(qǐng)一定要仔細(xì)閱讀說明書,按照傳代步驟操作,請(qǐng)保持和商家一樣的培養(yǎng)方式,比如說,牛是吃草的,你想改善它的營養(yǎng),也只能把草的質(zhì)量提高,千萬不能換成肉啊 ,不只貴還會(huì)把牛餓死。


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安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對(duì)細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。

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