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Poroshell 五大金剛之 CS-C18 改善堿性化合物峰形和容量
本研究使用甲酸和乙腈梯度對堿性藥物化合物進行了分離。比較了兩種表面多孔顆粒填料 C18 色譜柱:表面帶電荷的 Agilent InfinityLab Poroshell 120 CS-C18 和傳統的 C18 鍵合相色譜柱。使用簡單且普遍適用的甲酸流動相時,這些堿性分析物在帶電荷表面色譜柱上獲得的峰形優于傳統 C18 柱。傳統 C18 色譜柱需要使用不太理想的三氟乙酸流動相來改善峰形。進一步的研究表明,帶電荷表面色譜柱還提高了堿性分析物的載樣量,能夠改善雜質分析的檢測限。
Poroshell 120 CS-C18 色譜柱將表面多孔型雜化顆粒與表面電荷技術相結合,既保留了高效低壓的優勢,又能耐受廣泛的 pH 范圍,滿足 LC 和 LC/MS 方法開發高效快速的需求。
系統配置
Agilent 1290 Infinity II 全能泵 (G7104A)
Agilent 1290 Infinity II 樣品瓶 進樣器 (G7129B)
Agilent InfinityLab 液相色譜系列 集成式柱溫箱 (G7130A)
Agilent Ultivo LC/TQ (G6465A)
Agilent 1290 Infinity II 二極管 陣列檢測器 (G7117B)
UHPLC方法參數
LC/TQ 采集方法參數
結果與討論
使用六種化合物標樣,比較了3 種分析條件下的性能。色譜圖顯示了使用簡單的甲酸流動相在 InfinityLab Poroshell 120 CS-C18 色譜柱上獲得的 6 種堿性藥物化合物的分離情況。中間的色譜圖展示了使用相同流動相時傳統 C18 色譜柱的性能。相比表面帶電荷的 C18,傳統 C18 色譜柱上獲得的峰更寬。底部色譜圖顯示,使用三氟乙酸流動相可改善傳統 C18 色譜柱的峰寬,如峰寬圖所示。由于三氟乙酸 pH 值極低,通常被認為是不理想的流動相。低 pH 值可能具有破壞性,且難以從色譜柱和 LC 系統中徹底清除。對于 LC/MS 用戶來說,由于三氟乙酸的離子 抑制作用,還會大幅降低信號強度。
堿性藥物化合物的色譜性能比較
清楚表明,表面帶電荷的 CS-C18 可使阿米替林始終保持較窄的峰形。即使在色譜 柱過載的情況下,其峰寬也始終比其他三 種傳統 C18 色譜柱窄。
中等載樣量和高載樣量下 CS-C18 于傳統 C18 之間的性能差異
InfinityLab Poroshell 120 CS-C18 色譜柱更低的過載效應意味著其能在堿性化合物的雜質分析中表現得更出色。在雜質分析中,主要化合物的濃度通常較高,而其他目標分析物的濃度較低。對雜質含量為 0.25%(按重量計)的高濃度阿米替林樣品的雜質分析,隨載樣量增大,傳統的 C18 主峰大幅展寬,覆蓋了較早洗脫的雜質峰,并且明顯的峰拖尾現象影響了晚洗脫的雜質的峰形,而使用Poroshell 120 CS-C18 色譜柱時,主峰仍保持較窄的峰寬,足以與其前后的雜質峰分離。
在 CS-C18 和傳統 C18上對阿米替林 +0.25% 雜質進行雜質分析
結論
在簡單的甲酸流動相條件下分析堿性分析物時,表面帶電荷 Agilent InfinityLab Poroshell 120 CS-C18 色譜柱比傳統 C18 鍵合相具有更出色的性能。獲得的峰形更高且更尖銳,提供了更高的分離度和靈敏度。CS-C18 還提高了載樣量,并能保持出色的堿性化合物峰形,實現更靈敏的雜質分析。