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熒光分光光度計(jì)小知識(shí)
一、普遍性:熒光分光光度計(jì)是最常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)儀器,主要用于對(duì)經(jīng)光源激發(fā)后產(chǎn)生熒光的物質(zhì)或經(jīng)化學(xué)處理后產(chǎn)生熒光的物質(zhì)成分分析。用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器,有濾光片熒光計(jì)、濾光片-單色器熒光計(jì)等。
二、熒光測(cè)量中常用的光源包括高壓汞燈或氙燈。氙燈產(chǎn)生強(qiáng)烈的連續(xù)輻射,其波長(zhǎng)范圍在250~700nm;目前大部分熒光分光光度計(jì)都采用150W和500W的氙燈作光源;現(xiàn)代熒光儀器有采用12 V50W的新型溴鎢燈作光源,在300~700nm波段發(fā)射連續(xù)光譜。
三、激發(fā)單色器作用是將不需要的光除去,使需要的激發(fā)光透過(guò)而照射到樣品池。熒光單色器是濾光片將由激發(fā)光所發(fā)生的反射光、瑞利散射光、拉曼散射光和由溶液中雜質(zhì)所發(fā)生大多數(shù)的熒光濾去。熒光分光光度計(jì)都采用光柵分光,可以獲得單色性好的激發(fā)光,并能分出某一波長(zhǎng)的熒光,以減少干擾,而且可以掃描激發(fā)光譜或熒光光譜。
四、通常用石英,四面均透光。形狀有正方形、長(zhǎng)方形或圓形,但常用正方形樣品池,因其散射干擾較少。
五、熒光分光光度法在各個(gè)領(lǐng)域內(nèi)得到廣泛應(yīng)用:諸如有機(jī)電致發(fā)光和液晶等工業(yè)材料;水質(zhì)分析等環(huán)境相關(guān)領(lǐng)域;熒光試劑的合成與開(kāi)發(fā)等制藥領(lǐng)域;細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度測(cè)定等生物技術(shù)相關(guān)領(lǐng)域。蘇州思普萊代理的日立熒光光度計(jì)以其高靈敏度,快速的掃描速度以及優(yōu)異的性能為越來(lái)越多的實(shí)驗(yàn)人員帶來(lái)高效的科研成果,助力科研創(chuàng)新!
六、熒光光譜法具有靈敏度高、選擇性強(qiáng)、用樣量少、方法簡(jiǎn)便、工作曲線線形范圍寬等優(yōu)點(diǎn),可以廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)和藥理學(xué)、有機(jī)和無(wú)機(jī)化學(xué)等領(lǐng)域。
1.在使用熒光分光光度計(jì)實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,應(yīng)提前打開(kāi)儀器預(yù)熱,并配制好所需的溶液,對(duì)于已經(jīng)配制好的溶液,在不用時(shí)放在4℃冰箱中保存,放置時(shí)間超過(guò)一星期的溶液要重新配制。
2.使用熒光分光光度計(jì)實(shí)驗(yàn)所用的樣品池是四面透光的石英池,拿取的時(shí)候用手指掐住池體的上角部,不能接觸到四個(gè)面,清洗樣品池后應(yīng)用擦鏡紙對(duì)其四個(gè)面進(jìn)行輕輕擦拭。
3.使用熒光分光光度計(jì)在測(cè)試樣品時(shí),注意熒光強(qiáng)度范圍的設(shè)定不要太高,以免測(cè)得的熒光強(qiáng)度超過(guò)熒光分光光度計(jì)儀器的測(cè)定上限。
4.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,要及時(shí)地清理熒光分光光度計(jì)臺(tái)面,處理廢液,清洗和放置好樣品池,將下次要用的溶液放回冰箱,并且按規(guī)定登記實(shí)驗(yàn)記錄,養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣。