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SD大鼠肝內膽管上皮細胞說明書

閱讀:393      發布時間:2023-02-27
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SD大鼠肝內膽管上皮細胞

Catalogue No.: YLK745

Product Format: a T25 flask

Culture Properties貼壁

Complete Growth Medium: H-DMEM+10%FBS+1%雙抗

Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%

Application:  Cells and cancer research

NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.

Components 

Item

Specifications

a T25 flask

2X106

Manual

1 copy

Operation steps for cell culture

  1. 吸走多余培養基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養瓶潤洗細胞;

  2. 吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養皿使胰酶浸沒細胞表面,培養瓶放37度培養箱消化;(細胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴重影響細胞狀態,導致細胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細胞消化到細胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細胞wan漂浮。混勻細胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)

  3. 加入6-8mlwan全培養基終止消化,輕輕吹下細胞混勻;

  4. 將混勻的細胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養基重懸37度培養箱繼續培養(建議T25瓶加10-12mlwan培養基,10cm皿加12-15ml);

傳代比例: 不同細胞生長速度不一,具體傳代比例視細胞生長速度而定,大部分細胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細胞可以1:2傳代。

Cell cryopreservation

1.凍存液:92%wan培養基+8%DMSO(可以根據實驗室條件自行選擇)

2.降溫步驟:410min-202h-80過夜后液氮保存。

Tips

1.      細胞經過運輸后,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞si亡破碎形成碎片,是正常現象。貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900-1000rpm(150g)離心3min,棄上清。加5ml PBS重懸細胞,再900-1000rpm(150g)離心3min,用新鮮的wan全培養基重懸接種到新的培養瓶。第二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時碎片比較少,傳代時可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多,建議PBS多洗幾次。

2.      細胞生長不均時,可以將細胞消化吹散后加入新的培養基重新接種或傳代。

3.      細胞生長緩慢時,可以選擇提高血清濃度培養(最高不超過20%),也可以根據細胞生長狀態,選擇傳代細胞到新的培養瓶中繼續培養。

4.      不同細胞貼壁性差異比較大,所以消化時間差別較大,20s-10min均有可能,具體以細胞消化到相互分離但未脫落,并可以輕輕吹下為準,嚴禁消化到細胞wan全漂浮。客戶消化過度導致細胞死亡、漂浮、生長緩慢,不提供免費售后服務。

5.      干冰發貨均為兩支,客戶先復蘇一支,若復蘇失敗及時聯系我方并在我方指導下復蘇第二支。若客戶同時復蘇兩支均狀態不佳,我方不提供免費售后服務

6.      細胞狀態正常時,應盡快凍存細胞保種,凍存后應隨機抽取一支檢測凍存效果。我方不對客戶凍存細胞導致死亡負責,客戶凍存細胞死亡不提供免費售后服務。

7.      建議使用本庫原裝培養體系培養細胞,其他品牌培養基及血清培養效果無法保證,培養出現異常不予售后。

Notice

      客戶收到細胞有任何疑問請及時致電我們,細胞收到后1周內沒有任何電話,或其他形式回訪,默認為細胞質量沒問題,之后出了任何問題不給予免費售后。細胞免費售后只提供一次,若重發后再次培養死亡不再免費補發,細胞收貨時已經死亡或密度不足的除外。

提供商

優利科(上海)生命科學有限公司

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