精品亚洲a∨无码专区毛片-精品亚洲aⅴ无码午夜在线-精品亚洲aⅴ无码午夜在线观看-精品亚洲aⅴ无码一区二区三区-精品亚洲aⅴ无码专区毛片-精品亚洲aⅴ在线

您好, 歡迎來到化工儀器網

| 注冊| 產品展廳| 收藏該商鋪

15021281375

Download

首頁   >>   資料下載   >>   豬CD68免疫組化試劑盒說明書

優利科(上海)生命科學有...

立即詢價

您提交后,專屬客服將第一時間為您服務

豬CD68免疫組化試劑盒說明書

閱讀:405      發布時間:2023-03-09
分享:

CD68免疫組化試劑盒

該試劑盒以HRP標記的鏈霉親和素復合物(HRP Streptavidin ConjugateHRP-SA)為基礎,可用于檢測細胞、組織內的特異性CD68抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強、定性定位準確、背景清晰。在所用的CD68一抗與相應靶抗原結合后,用生物化二抗與一抗特異性結合,最后加入HRP-SA,形成抗原—特異一抗—生物素化二抗—HRP-SA復合物,顯微鏡下觀察成像。

 638139485120662777942.jpg 

試劑盒所含試劑:

試劑A 通透液:0.1% Triton-X 100   10 mL(選用)

試劑B 封閉緩沖液(封閉用) 20 mL

試劑C (原裝jin口分裝)已稀釋的即用型CD68一抗(2.5ml

試劑D (原裝jin口分裝)生物素化羊抗兔IgG 1

(濃度1.5 mg/mL,稀釋比為1:300~1:50050 μL+抗體稀釋液20ml

試劑E HRP-SA復合物1支(濃度1 μM,稀釋比1:50~1:200100 μL

試劑F DAB顯色液 5ml

用戶自備試劑:

1 10mM TBSpH7.2~7.4

三羥基氨基甲烷1.21g

氯化鈉7.6g

加蒸餾水800mL,濃鹽酸調pH值至7.2~7.4,最后定容至1000mL

TBS-TTBS+Tween 200.05%體積比)

2.抗原修復液(依檢測抗原不同而選擇不同的修復液)

10mM pH6.0 檸檬酸緩沖液

檸檬酸0.38g

檸檬酸三鈉2.45g

加蒸餾水900mL,濃鹽酸調pH值至6.0,最后定容至1000mL

或:0.5M EDTA修復液(pH8.0

EDTA·2H2O 186.1g

檸檬酸三鈉2.45g

加蒸餾水700mL,用10mM NaOH調pH值至8.0,最后定容至1000Ml

3. 緩沖甘油封固劑10 mL

4. Tween 20 5 mL

石蠟包埋組織切片免疫染色

實驗步驟(建議方案):

石蠟包埋組織切片3~4μm 厚度

1.烤片: 將待做切片置于切片架上,于60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr

2.脫蠟: 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3次(即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),每次10 min

3.水化: 切片經下行酒精水化,無水乙醇5min95%乙醇2次(每次2min),85%乙醇2 min75%乙醇2min,自來水沖洗,ddH2O2×2min

4.抗原修復: 根據抗體說明書推薦方法進行抗原修復,常采用高壓、微波(溫度達到98~100℃)或酶消化修復法,室溫自然冷卻,自來水沖洗,ddH2O2×2minTBS洗滌(2×2min)(具體修復方法見附1* 注:有些抗原勿需修復,直接進入第5步封閉。

5.封閉: 滴加試劑B37℃濕盒孵育30 min

6.加一抗:滴加用試劑C(即用型一抗),37℃濕盒孵育2 hr 4℃過夜;

7.洗滌: TBS-T洗滌(3×5 min);

8.封閉: 滴加試劑B37℃濕盒孵育10 min

9.加二抗: 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗(試劑D),37℃濕盒中孵育30 min

10.洗滌: TBS-T洗滌(3×5 min);

11.封閉: 滴加試劑Tween 2037℃濕盒孵育封閉20 min

12.HRP-SA: 滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑E150~200,終濃度5~20 nM),37℃濕盒中孵育30 min

13.洗滌: TBS-T洗滌(3×5 min),TBS洗滌(2×5 min);

14.顯色:應用DAB溶液(試劑F)顯色;

15.復染:自來水充分沖洗,復染,脫水,透明;

16.封片: 待組織標本干后,用試劑緩沖甘油封固劑封片;

17.觀察成像: 顯微鏡下觀察成像。

注意事項:

1. 修復后緩沖液須自然冷卻,自來水沖洗后方能把切片取出,驟冷有可能導致結晶或抗原封閉。

2. 緩沖液的量必須保證所有切片都能浸泡到,用過的檸檬酸緩沖液不能反復使用。

3. 若試劑為微量濃縮液,用前應低速離心,將內蓋和管壁附著的溶液離到底部。

4. 封片前一定要換用TBS充分洗滌,以便洗去組織上殘留的Tween 20,否則會影響結果觀察。

5. 如須復染細胞核,則在封片前復染或直接采用含有染核試劑的封片劑進行封片。

1

抗原修復方法

常用抗原修復液:檸檬酸緩沖液(0.01M pH6.0)、EDTA抗原修復液(pH8.09.0)等等。

一、酶消化修復法

切片脫蠟水化處理,TBS沖洗,在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶,37℃孵育20~30minTBS沖洗即可。

二、微波抗原修復法

微波盒中加入抗原修復液微波加熱至沸騰,將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上,放入已沸騰的緩沖液中,中檔或高檔繼續微波10~15min,取出微波盒冷卻至室溫后,自來水沖洗,取出切片。因不同微波爐微波處理時間存在差異,須自行調整。

三、直接高壓抗原修復法

取修復液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰,將組織切片置于耐高溫切片架上,修復液沸騰后放入切片架,蓋上鍋蓋,待噴氣后計時1.5~2.5min即可脫離熱源,自然冷卻至室溫后自來水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復。

四、隔水式高壓抗原修復法

不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰,微波盒中加入修復液于微波爐中加熱至沸騰,將切片放入微波盒中,再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋,待噴氣后計時4~8 min即可關閉熱源,自然冷卻至室溫后自來水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測或核抗原的修復。

提供商

優利科(上海)生命科學有限公司

下載次數

10次

資料大小

155KB

資料類型

WORD 文檔

資料圖片

點擊查看

瀏覽次數

405次

產品展示

會員登錄

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 日韩国产亚洲一区二区三区| 99久久免费看少妇高潮a片特黄| 裸体免费在线观看| 国产天天射| 成人免费无码大片搞中出| 青草视频网址| 欧美片内射欧美美美妇| 丁香五月综合缴情综合| 欧美黑人又粗又大又爽免费| 国产熟女系列丰满熟妇| av电影东京热无码专区| 浪潮AV色综合久久天堂| 成熟丰满熟妇AV无码区| av潮喷大喷水系列无码| 久久久久国产精品麻豆ar影院 | 欧洲无线一线二饯三w955| 人妻仑乱少妇A片| 成av免费大片黄在线观看| 免费在线1区2区3区| 不得不看的极品av作品| 91精品婷婷国产综合久久| 久久久久国产精品熟女影院| 在线精品一区二区三区| 久久99精品久久久| 国产欧美精品专区一区二区| 五月天精品视频在线观看| 国产天堂| 国产黄A片三級三級三級| 日本中文字幕一区二区三区不卡| 麻豆精品国产精华液好用吗| 潮喷无码免费视频| 久久久无码精品亚洲A片不见| 天天综合色天天综合网| 国产99高清一区二区| 国产三级a在线观看中国| 五月色婷婷中文开心字幕| 一区二区传媒有限公司| 国产h视频在线观看视频 | 青草青华人在线观看视频| 岛国色情A片无码视频免费看| 99久久久无码国产精品性波多|