白蛋白含量試劑盒說明書
微量法100T/96S
注 意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
白蛋白由肝實質細胞合成,在血漿蛋白中含量最多,具有重要的生理功能,包括維持膠體滲透壓,并可與長鏈脂肪酸、膽汁酸、膽紅素、血紅素、鈣和鎂離子等物質結合。它擁有抗氧化性和抗凝血性,能充當營養物質和藥物的運輸載體,同時也是血漿PH值的緩沖劑。血清白蛋白含量直接關系到肝臟疾病、腎臟疾病、營養不良或蛋白流失性腸道病癥的發生發展,是臨床檢測的一個重要指標。
測定原理:
白蛋白在pH4.2的緩沖液中帶正電荷,可與帶負電荷的染料溴甲酚綠結合形成藍綠色復合物,在波長630nm處有吸收峰,在一定范圍內其顏色深淺與白蛋白濃度成正比例。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。
標準品:液體0.5mL×1瓶,4℃保存。
樣品處理:
1. 血清:直接檢測。
2. 尿液:直接檢測。
測定操作表:
空白管 | 標準管 | 測定管 | |
蒸餾水(μL) | 2 | ||
標準品(μL) | 2 | ||
樣本(μL) | 2 | ||
試劑一(μL) | 200 | 200 | 200 |
混勻,25℃靜置1min,于微量石英比色皿/96孔板,空白管調零,測定630nm處吸光值A。分別記為A標準管和A測定管 |
計算公式:
白蛋白濃度(mg/mL)= A測定管÷A標準管×C標準管
=5×A測定管÷A標準管
C標準管:5mg/mL
注意事項:
1. 靜置1min后盡快完成測定,以免引起非特異性呈色反應。
2. 線性范圍為2mg/mL-40mg/mL。
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