精品亚洲a∨无码专区毛片-精品亚洲aⅴ无码午夜在线-精品亚洲aⅴ无码午夜在线观看-精品亚洲aⅴ无码一区二区三区-精品亚洲aⅴ无码专区毛片-精品亚洲aⅴ在线

您好, 歡迎來到化工儀器網

| 注冊| 產品展廳| 收藏該商鋪

15021281375

Download

首頁   >>   資料下載   >>   脂肪酸合成酶(FAS)活性試劑盒說明書

優利科(上海)生命科學有...

立即詢價

您提交后,專屬客服將第一時間為您服務

脂肪酸合成酶(FAS)活性試劑盒說明書

閱讀:332      發布時間:2023-05-10
分享:

脂肪酸合成酶(FAS)活性試劑盒說明書

                                                         微量法100T/96S



   正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義:

FAS是脂肪酸合成關鍵酶,催化乙酰輔酶A和丙二酰輔酶A而生成長鏈脂肪酸。FAS普遍表達于各種組織細胞中,在哺乳動物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達豐富。

 

測定原理:

FAS催化乙酰CoA、丙二酰CoANADPH生成長鏈脂肪酸和NADP+;NADPH340nm有吸收峰,而NADP+沒有;通過測定340nm 光吸收下降速率,計算FAS活性。

自備儀器和用品:

研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調式移液槍和蒸餾水。

 

試劑組成和配制:

試劑一:液體100mL×1瓶,-20℃保存。用前1d取出置于4℃充分解凍后混勻。

試劑二:粉劑×1瓶。臨用前加入440μL試劑四,充分溶解,用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入440μL試劑四,充分溶解,用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

試劑四:液體20mL×1, 4℃保存。

試劑五:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入840μL試劑四,充分溶解,用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

 

粗酶液提?。?/span>

1.        組織:按照組織質量(g:試劑一體(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿。12000g,4離心40min,取上清置冰上待測。

2.        細菌、真菌:按照細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后12000g4,離心40min,取上清置于冰上待測。

3.        血清等液體:直接測定。

FAS測定操作:

1. 分光光度計/酶標儀預熱30min,調節波長到340 nm,蒸餾水調零。

2. 試劑四置于40℃水浴中預熱30 min。

3. 96孔板或EP管中依次加入20μL上清液、4μL試劑二、4μL試劑三、164μL試劑四和8μL試劑五,混勻后于340nm處測定吸光值,記錄第30s90s時吸光值,分別記錄為A1A2△A=A1-A2。

 

FAS活性計算:

a. 使用微量石英比色皿測定的計算公式如下

 

1)按照蛋白濃度計算

活性單位定義:37中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADPH 1個酶活單位。

FAS(nmol/min/mg prot) =(A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V)÷T

=1608×A÷Cpr

2)按照樣本質量計算

活性單位定義:37中每克組織每分鐘氧化1nmol NADPH 1個酶活單位。

FAS(nmol/min/g 鮮重) = (△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V÷V樣總)÷T

=1608×A ÷W

3)按細胞數量計算

活性單位定義:37中每104個細胞每分鐘氧化1nmol NADPH 1個酶活單位。

FAS(nmol /min/104cell) = (△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(細胞數量×V÷V樣總)÷T

=1608×A ÷細胞數量

4)按液體體積計算

活性單位定義:37中每毫升樣本每分鐘氧化1nmol NADPH 1個酶活單位。

FAS(nmol /min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V÷T

=1608×A

εNADPH摩爾消光系數,6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光徑,1 cm;V反總:反應體系總體積,200μL=2×10-4LCpr:上清液蛋白質濃度,mg/mLW 樣品質量;V樣:加入反應體系中上清液體積,20μL=0.02 mL;V樣總:提取液體積,1 mLT:反應時間,1min。

 

b. 使用96孔板測定的計算公式如下

1)按照蛋白濃度計算

活性單位定義:37中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADPH 1個酶活單位。

FAS(nmol/min/mg prot) =(A÷ε÷d×V反總×109)÷(Cpr×V)÷T

=3216×A÷Cpr

2)按照樣本質量計算

活性單位定義:37中每克組織每分鐘氧化1nmol NADPH 1個酶活單位。

FAS(nmol/min/g 鮮重) = (△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V÷V樣總)÷T

=3216×A÷W

3)按細胞數量計算

活性單位定義:37中每104個細胞每分鐘氧化1nmol NADPH 1個酶活單位。

FAS(nmol /min/104cell) = (△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細胞數量×V÷V樣總)÷T

=3216×細胞數量

4)按液體體積計算

活性單位定義:37中每毫升樣本每分鐘氧化1nmol NADPH 1個酶活單位。

FAS(nmol /min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109 )÷V÷T

=3216×A

εNADPH摩爾消光系數,6.22×103L/mol/cm;d96孔板光徑,0.5 cmV反總:反應體系總體積,200μL=2×10-4L;Cpr:上清液蛋白質濃度,mg/mL;W 樣品質量;V樣:加入反應體系中上清液體積,20μL=0.02 mLV樣總:提取液體積,1 mL;T:反應時間,1min。

提供商

優利科(上海)生命科學有限公司

下載次數

32次

資料大小

34.5KB

資料類型

WORD 文檔

資料圖片

點擊查看

瀏覽次數

332次

會員登錄

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 内射无套| 欧美性狂猛bbbbbbxxxx| 久久大香萑太香蕉av| 国产成人精品午夜福利| 日韩小视频在线| 日韩色情无码免费A片| 成人精品午夜一级毛片| 欧美变态老妇重口与另类| 欧美另类在线观看| 99国产精品白浆无码流出| 久久国产精品一久久精品| 韩国精品一区| 三级精品在线观看自拍| 金瓶梅电影在线| 亚洲一区二区三区四区五区黄| 中文无码乱人伦中文视频在线v| 韩国三级日本三级香港三级| 亚洲欧美另类专区| 无人区高清视频韩国在线观看| 国产亲妺妺乱的性视频播放| 熟女老妇久久视频| 中文字幕精品AV一区二区五区 | 欧美大片精品免费永久看nba| 亚洲91成人在线观看| 韩国男人的天堂 | 欧美久久久无码精品亚洲日韩小说 | 手机在线观看国产巨作AV| 熟女人妻-蜜臀AV-首页| 波多野结衣一区在线| 久久久人妻一区精品久久久| 中国精品黄片| 精华液一区二区区别| 国产精品国产精品专区不卡 | 国产精品自产拍在线观看| 日本伊人精品一区二区三区| 国产特黄特级AAAAA片| 91视频爱爱| 精品国产福利片在线观看 | 天天综合影院| 欧美最骚最疯日B视频观看| a级全黄试看30分钟|