土壤全硼試劑盒說明書
微量法100T/96S
注 意 :正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
硼是植物生長發(fā)育必需的七種微量營養(yǎng)元素之一,土壤中硼素的含量高低直接影響著植物的生長狀況。
測定原理:
硼與甲亞胺在弱酸條件下形成棕黃色配合物,在420nm有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器:
天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、馬弗爐、微量石英比色皿/96孔板。
試劑組成和配制:
提取劑:粉劑×1瓶,4℃保存。
提取液:液體100mL×4瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加8mL水溶解,加0.125mL乙酸。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加4mL蒸餾水溶解。
樣本處理:
新鮮土樣風(fēng)干,過100目篩,按照土壤質(zhì)量(g):提取劑質(zhì)量(g)為1:4的比例(建議稱取約0.1g土樣,加入0.4g提取劑)緩慢加入提取劑于坩堝中,邊加邊攪拌均勻,然后在馬弗爐中550℃熔融10min,然后在920℃熔融30min,趁熱取出坩堝,將熔融物轉(zhuǎn)入燒杯,邊攪拌邊加4mL提取液,必要時加蓋,防止溶液濺出,溶解30min后,5000g ,25℃離心10min,取上清液待測。
測定操作表:
空白管 | 測定管 | |
樣本(μL) | 40 | |
試劑一(μL) | 80 | 80 |
試劑二(μL) | 40 | 40 |
H2O(μL) | 80 | 40 |
充分混勻,25℃黑暗中靜置1h | ||
于微量石英比色皿/96孔板,蒸餾水調(diào)零,測定420nm處吸光值A,分別記為A空白管和A測定管,△A=A測定管-A空白管 |
計算公式:
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.3897x - 0.2359,R2 = 0.9995
全硼含量(mg/kg)=(△A+0.2359)÷ 0.3897×V反總÷(W×V樣÷V樣總)
= 51.32×(△A+0.2359)÷W
V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.04mL;V樣總:加入提取液體積,4mL,W:樣本質(zhì)量,g
a. 用96孔板測定的計算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.1949x - 0.2359,R2 = 0.9995
全硼含量(mg/kg)=(△A+0.2359)÷ 0.1949×V反總÷(W×V樣÷V樣總)
=102.64×(△A+0.2359)÷W
V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)體系中加入樣本體積,0.04mL;V樣總:加入提取液體積,4mL,W:樣本質(zhì)量,g
注意事項:
1. 配制好的試劑二4℃保存不可超過7天。
2. 顯色時嚴(yán)格控制溫度并且避光,以免顯色劑見光分解。
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)
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