土壤全鈦試劑盒說明書
微量法100T/96S
注 意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
鈦是自然界廣泛存在的過渡金屬元素,與鐵元素緊密共生,二者存在一定的相關性,土壤中鈦對植物有及其重要的生理作用,充足的鈦可保證植物結實率提高,空癟率減少,并增強植物的抗害效果。
測定原理:
在酸性條件下,二安替比林甲烷與鈦離子生成黃色絡合物,在390nm處有特征吸收峰,顏色深淺在一定范圍內與鈦離子濃度成正比。
自備實驗用品及儀器:
天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板,HCl。
試劑組成和配制:
提取液:自備。HCl:H2O =1:1。
試劑一:粉劑×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加4mL水充分溶解。
試劑三:液體8mL×1瓶,4℃保存。
樣本處理:
按照土壤質量(g):試劑一質量(g)為1:5的比例(建議稱取約0.1g土樣,加入0.5g試劑一)稱取土樣于坩堝中,在900℃熔融20min,趁熱加10mL提取液溶解熔塊,待wan全溶解后于10000g ,25℃離心10min,取上清液待測。
測定操作表:
空白管 | 測定管 | |
樣本(μL) | 40 | |
試劑二(μL) | 40 | 40 |
提取液(μL) | 80 | 40 |
試劑三(μL) | 80 | 80 |
充分混勻,25℃靜置30min,于微量石英比色皿/96孔板,測定390nm處吸光值A,分別記為A空白管和A測定管,△A=A測定管-A空白管 |
計算公式:
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線:y = 0.1064x +0.0078,R2 = 0.9971
全鈦含量(mg/kg)=(△A-0.0078)÷ 0.1064×V反總÷(W×V樣÷V樣總)
= 469.92×(△A-0.0078)÷W
V反總:反應總體積,0.2mL;V樣:反應體系中加入樣本體積,0.04mL;V樣總:加入提取液體積,10mL,W:樣本質量,g
b. 用96孔板測定的計算公式如下
標準曲線:y = 0.0532x +0.0078,R2 = 0.9971
全鈦含量(mg/kg)=(△A-0.0078)÷ 0.0532×V反總÷(W×V樣÷V樣總)
= 939.84×(△A-0.0078)÷W
V反總:反應總體積,0.2mL;V樣:反應體系中加入樣本體積,0.04mL;V樣總:加入提取液體積,10mL,W:樣本質量,g
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