水樣中汞離子(Hg2+)濃度檢測試劑盒說明書
微量法100T/96S
注 意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
Hg2+是水體中重要有毒重金屬離子,易被生物體吸收并且積累,能夠通過食物鏈進一步傳遞,從而造成傷害。典型的水俁病就是汞中毒的一種。
測定原理:
水樣經消化后,在酸性環境中,Hg2+能與二硫腙生成橙色絡合物,溶于三氯jia烷,在490nm測定吸光度,即可計算Hg2+含量。
自備儀器和用品:
恒溫水浴鍋、可調式移液槍、濃硫酸、三氯jiua烷、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體30mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體5mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體7mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保存。加三氯jia烷(自備)35 mL充分溶解。
標準品:液體1mL×1瓶,4 nmol/mL Hg2+,室溫保存。
水樣中汞離子檢測:
1. 消化
(1)水樣消化:取1.5mL EP管,依次加入300μL水樣,30 μL濃硫酸(自備),240μL試劑一,混勻后蓋緊,置于40℃水浴中消化24 h。
(2) 標準品消化:取1.5mL EP管,依次加入30μL標準品,270μL蒸餾水,30 μL濃硫酸,240μL試劑一,混勻后蓋緊,置于40℃水浴中消化24 h。
2. 取出各管,室溫放置約20min,使之冷卻。然后加入48μL試劑二,蓋緊后充分震蕩,直到無色。開蓋靜置30min,期間搖蕩數次,使其中氣體溢出。
3. 加入300μL試劑五,加入60 μL試劑四,充分震蕩后靜置分層。
4. 靜置分層后,取移液槍,調節刻度到210μL,排氣后沿管壁小心插入下層,吸取210μL下層液體,加入微量石英比色皿/96孔板,于490nm處比色,記錄各管吸光值。
注意:標準管只需測定一次。
汞離子濃度計算:
Hg2+(nmol/L)= C標準品÷標準品稀釋倍數×(A測定管÷A標準管)×V總
=400×(A測定管÷A標準管)
C標準品:標準品濃度,4 nmol/mL;標準品稀釋倍數:(30μL標準品+270μL蒸餾水)÷30μL標準品=10; V總:1L=1000 mL。
注意事項:
1. 水樣中1000μg/L銅離子,20μg/L銀離子,10μg/L金離子,5μg/L鉑離子對測定無干擾。
2. 測定過程中應注意安全,佩戴口罩和手套,以免吸入或沾到有毒及危險試劑。
3. Z低檢出限為0.1μmol/L。
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